Питательная среда HiMedia M2096I-500G Основа кровяного агара (для листерий) — порошковая основа для приготовления кровяного агара с добавлением 5–7 % стерильной дефибринированной крови овцы. Применяется для выявления гемолитических реакций видов Listeria в пищевых продуктах, кормах для животных и образцах окружающей среды; хранится при 10–30 °C.

Назначение

Основа кровяного агара предназначена для исследования гемолитических реакций видов Listeria, выделенных из пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды на предприятиях пищевого производства и в сфере обращения с пищевой продукцией.

Среда рекомендована для выделения видов Listeria из указанных образцов. После добавления 5–7 % стерильной дефибринированной крови овцы среда позволяет выявлять гемолитический профиль и дифференцировать патогенные β-гемолитические виды Listeria, включая L.monocytogenes, L.seeligeri и L.ivanovii, от негемолитических и непатогенных видов, включая L. innocua, L. grayi и L.welshimeri.

Среда также может применяться для постановки CAMP-теста, позволяющего дифференцировать виды внутри рода. CAMP-тест проводят с использованием S. aureus и Rhodococcus equi. Другие штаммы Listeria, включая L.fleischmanii, L.marthii, L.rocourtiae и L. weihenstephanensis, демонстрируют отрицательную β-гемолитическую реакцию; при постановке CAMP-теста с S. aureus и R. equi также наблюдается отрицательная реакция.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован в соответствии с параметрами эффективности среды.

Эквивалентен ферментативному перевариванию тканей животных.

Эквивалентен перевариванию печени.

• Пептон, экстракт HML и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5–7 % по объёму стерильной дефибринированной крови овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

L. monocytogenes — грамположительная факультативно-анаэробная палочковидная бактерия. Микроорганизм способен расти в условиях охлаждения, поэтому представляет значимую проблему для пищевой промышленности.

Выделение Listeria из пищевых продуктов и образцов окружающей среды часто сопровождается низкой степенью восстановления микроорганизмов и требует этапа обогащения с последующим выделением. Для обнаружения видов Listeria, особенно L. monocytogenes, применяют селективные и дифференциальные питательные среды.

Основа кровяного агара с добавлением 5–7 % стерильной дефибринированной крови овцы используется для определения гемолитического характера роста. Среда позволяет отличать β-гемолитические патогенные виды Listeria от видов, не проявляющих β-гемолиз и не являющихся патогенными.

Тип образца

Чистые изоляты из:

• пищевых продуктов;
• кормов для животных;
• образцов окружающей среды на предприятиях пищевого производства и в сфере обращения с пищевой продукцией.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим указаниям и требованиям ISO 11290-1:2017 и ISO 11290-2:2017.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими указаниями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

• Гемолитический профиль зависит от источника используемой крови.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M2096I-500G
• Назначение изделия: основа
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Среда после добавления 5–7 % по объёму стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишнёво-красного цвета в чашках Петри.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,25 % по массе при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавлением 5 % по массе стерильной дефибринированной крови при 35–37 °C в течение 18–24 ч. При необходимости инкубацию продолжают до получения удовлетворительного роста.