Хромогенная основа агара HiMedia M2094-500G Основа HiCrome агара для колистин-резистентных бактерий предназначена для приготовления селективной среды с конечным pH 7,3 ± 0,2. Продукт применяют для выделения и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов, устойчивых к колистину, с последующим подтверждением устойчивости методом микроразведения в бульоне.

Назначение

Основа HiCrome агара для колистин-резистентных бактерий предназначена для выделения и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов, устойчивых к колистину.

Среда разработана для обнаружения и дифференциации устойчивых к колистину видов семейства Enterobacteriaceae, E. coli, K. pneumoniae и видов Salmonella. Среда используется для скрининга; окончательную идентификацию изолятов проводят биохимическими тестами, а устойчивость микроорганизмов к колистину подтверждают методом микроразведения в бульоне в соответствии с рекомендациями CLSI.

Колистин применяется как антибиотик последнего выбора из-за нефротоксичности и ототоксичности и обладает активностью преимущественно против грамотрицательных бактерий. На фоне роста инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями с множественной лекарственной устойчивостью, колистин вновь используется в терапии. Плазмидно-опосредованная устойчивость к колистину, связанная с геном mcr-1 и переносом фосфоэтаноламина, была выявлена в Китае. Клинические данные указывают, что применение колистина может быть приемлемо безопасным при соблюдении необходимых мер предосторожности.

Принцип дифференциации

Ациказа обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, серой и другими необходимыми питательными веществами. Введённая хромогенная смесь обеспечивает цветовую дифференциацию колоний.

Хромогенные субстраты избирательно расщепляются ферментами микроорганизмов:

• устойчивые к колистину E. coli продуцируют β-D-галактозидазу, в результате чего формируются колонии от розового до фиолетового цвета;
• устойчивые к колистину K. pneumoniae расщепляют другой хромогенный субстрат с образованием колоний металлически-синего цвета;
• виды Pseudomonas образуют бесцветные колонии, иногда со светлым пигментом;
• аминокислоты, включая фенилаланин и триптофан, поступающие из пептонов, обеспечивают выявление активности триптофандезаминазы: виды Proteus, Morganella и Providencia проявляются образованием коричневых колоний.

Состав

Содержание компонентов приведено для 1 л среды.

Гидролизат казеина кислотами.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 38,50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки ColRes Selective Supplement (FD355).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Исследуемые образцы

Тип образца: клинические образцы, включая мочу и кал.

Для клинических образцов применяйте надлежащие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,7 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета, формирующийся в чашках Петри.

Реакция среды

Реакция: реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,85 % при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначение «*»: соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Из-за общих структурных особенностей колистина, антимикробных пептидов и церагенинов может возникать перекрёстная устойчивость.
2. У устойчивых к колистину изолятов и штаммов, полученных путём последовательного воздействия колистина, минимальные подавляющие концентрации могут увеличиваться в несколько сотен раз по сравнению с чувствительными штаммами.
3. Окончательную идентификацию необходимо проводить с использованием биохимических тестов.
4. Устойчивость микроорганизмов к колистину необходимо подтверждать методом микроразведения в бульоне.

Условия хранения и срок годности

Храните сухой продукт при 15–25 °C в плотно закрытой таре. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении по инструкции на этикетке, соблюдении рекомендованной температуры хранения и использовании до окончания срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.