HiMedia M2093-500G Основа агара Бэрд-Паркера без яично-желточной эмульсии

Питательная среда HiMedia M2093-500G Основа агара Бэрд-Паркера без яично-желточной эмульсии — сухая основа массой 500 г для приготовления селективной среды. Предназначена для прямого количественного определения коагулазоположительных стафилококков в клинических и пищевых образцах без использования эмульсии яичного желтка; для подтверждения требуется дополнительное биохимическое исследование.

Назначение

Основа агара Бэрд–Паркера без яично-желточной эмульсии предназначена для выделения и количественного определения стафилококков, включая коагулазоположительный Staphylococcus aureus, в пищевых и клинических образцах.

Типы образцов

• Клинические образцы: гной, материал из ран, поражений кожи и другие аналогичные образцы.
• Пищевые образцы.

Состав

Состав рассчитан и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих характеристик. Обозначение HM Peptone B# соответствует мясному экстракту.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Эквивалентная масса обезвоженной среды: 47,73 г/л
• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Масса упаковки: 500 г

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 47,73 г порошка, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Агар Бэрд–Паркера разработан на основе теллурит-глициновой формуляции Zebovitz и предназначен для выделения и количественного определения стафилококков в пищевых и других материалах с дифференциацией коагулазоположительных штаммов.

Между результатом коагулазного теста и появлением прозрачной зоны липолиза на среде выявлена высокая корреляция. Прозрачная зона обусловлена действием стафилококковой лецитиназы, расщепляющей яичный желток. Ограничением классической среды является недостаточная активность по осветлению яичного желтка для дифференциации S. aureus от других бактерий-контаминантов.

Среда без добавления эмульсии яичного желтка предназначена для выделения стафилококков из пищевых образцов. По сравнению с другими средами при сопоставимых условиях она характеризуется меньшим ингибированием Staphylococcus aureus и обеспечивает селективный рост. В этой формуляции эмульсия яичного желтка заменена Твином 80 и ионами магния. Эффективность среды сравнивалась с основой агара Бэрд–Паркера; полученные результаты были сопоставимыми.

Функции компонентов:

• Триптон, пептон HM B и дрожжевой экстракт являются источниками азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, серы и витаминов.
• Твин 80 и ионы магния способствуют идентификации коагулазной активности.
• Мальтоза является источником углеводов.
• Ацетат натрия оказывает ингибирующее действие на грамотрицательные бактерии.

В качестве альтернативы среду можно исследовать с добавкой ингибитора трипсина плазмы фибриногена FD195. На такой среде коагулазоположительные колонии через 24–48 ч инкубации при 35 °C имеют цвет от белого до серо-чёрного и окружены непрозрачной зоной, обусловленной коагулазной активностью. Из-за отсутствия эмульсии яичного желтка необходимо восстановление теллурита. В результате формируется полупрозрачный агар, на котором колонии стафилококков имеют цвет от белого до серого.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки материала согласно действующим лабораторным руководствам.
• Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки материала согласно применяемым методикам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Несмотря на рекомендацию для выявления коагулазоположительного Staphylococcus aureus, на среде могут расти другие бактерии.
2. Некоторые стрессированные клетки Staphylococcus aureus могут демонстрировать слабый рост.
3. Для подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель светло-жёлтого цвета, слегка опалесцирующий.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,8 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,80–7,20.
• Конечный pH: 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

• Номера, соответствующие WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения закрытой упаковки: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Условия хранения порошка: в плотно закрытом контейнере, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Гигроскопичность порошка может приводить к образованию комков; неправильное хранение повышает вероятность комкования.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Безопасность и утилизация

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Использованные или непригодные остатки продукта необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.
• Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, перед утилизацией необходимо обеззараживать и удалять в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительное техническое отличие

По сравнению с классической основой агара Бэрд–Паркера формуляция без эмульсии яичного желтка использует Твин 80 и ионы магния, а эффективность среды заявлена как сопоставимая с основой агара Бэрд–Паркера.