Селективный агар ХК с сердечно-мозговой вытяжкой HiMedia M209-100G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Селективный агар ХК с сердечно-мозговой вытяжкой HiMedia M209-100G (уп/500 гр) производства HiMedia для селективного выделения и культивирования патогенных и сапрофитных грибов из образцов, обильно загрязнённых бактериями. Среда предназначена для выявления Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis и других прихотливых патогенных грибов; хлорамфеникол подавляет грамположительные и грамотрицательные бактерии, а циклогексимид — большинство сапрофитных плесневых грибов.

Назначение

Селективный агар ХК с сердечно-мозговой вытяжкой предназначен для селективного выделения и культивирования прихотливых патогенных и сапрофитных грибов из исследуемого материала, обильно загрязнённого бактериями.

Применение:

• селективное выделение патогенных грибов;
• выделение грибов из клинических образцов;
• культивирование Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis и других патогенных грибов;
• выделение грибов, вызывающих системные микозы;
• выделение тканевой фазы Histoplasma capsulatum и других патогенных грибов, включая Coccidioides immitis, после обогащения среды 10 % овечьей кровью.

Технические характеристики

Состав

Состав на 1 л среды:

• Порошок инфузии HM эквивалентен инфузии телячьего мозга.
• Пептон HM B эквивалентен инфузии говяжьего сердца.
• Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эксплуатационных характеристик.
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Brain Heart CC Agar разработан на основе рецептуры Ajello и соавт. и McDonough и соавт. Среда предназначена для селективного выделения патогенных грибов.

• Хлорамфеникол — антибиотик широкого спектра действия, подавляющий рост широкого диапазона грамположительных и грамотрицательных бактерий.
• Циклогексимид подавляет большинство сапрофитных плесневых грибов и повышает вероятность выделения патогенных грибов.
• Порошок инфузии HM, пептон HM B и протеозопептон обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста прихотливых патогенных грибов.
• Декстроза служит источником углеводов.
• Гидрофосфат натрия выполняет буферную функцию.
• Для выделения системных грибов, плохо растущих на необогащённой среде, в среду можно дополнительно вводить 10 % овечьей крови.
• Добавление гентамицина в концентрации 50 мкг/мл среды повышает селективность.
• Антибиотики, входящие в состав среды, могут подавлять рост некоторых грибов.
• Добавление крови делает Brain Heart Infusion CC Agar пригодным для выделения тканевой фазы Histoplasma capsulatum и других патогенных грибов, включая Coccidioides immitis.

При работе с Histoplasma capsulatum необходимо соблюдать особую осторожность, чтобы предотвратить распространение инфекционных спор. Культуру следует исследовать в закрытом шкафу с фильтрацией воздуха.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 52,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Не допускайте чрезмерного нагрева, поскольку он может снизить селективность среды.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Посев и инкубация

Для выделения грибов из загрязнённых образцов селективную среду следует инокулировать одновременно с неселективной средой.

• Для общего выделения грибов среды инкубируют при 25–30 °C.
• Для выделения грибов, вызывающих системные микозы, инокулируют два комплекта сред:
  • один комплект инкубируют при 23–30 °C;
  • дублирующий комплект инкубируют при 35–37 °C.
• Чашки исследуют не менее одной недели.

Тип образца

Клинические образцы — патологический материал, например соскобы кожи.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 5,25 % водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2;
• диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 25–35 °C в течение 40–96 ч. Виды Trichophyton инкубируют 1–2 недели.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Антибиотики, содержащиеся в среде, могут подавлять рост некоторых грибов. При оценке результатов необходимо учитывать состав образца, условия инкубации и возможность роста микроорганизмов, чувствительных к компонентам среды.

Меры безопасности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера изучите маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила безопасной работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• При обращении с циклогексимидом избегайте контакта с кожей, образования аэрозоля и вдыхания: вещество очень токсично.
• Руководствуйтесь требованиями индивидуальных паспортов безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения обезвоженной и приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Из-за гигроскопичности продукта необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются лучше всего при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных приготовленных сред автоклавированием и/или сжиганием.

Инфекционные материалы следует утилизировать в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительные особенности

В отличие от неселективных питательных сред, Brain Heart CC Agar содержит хлорамфеникол и циклогексимид для подавления бактериальной флоры и большинства сапрофитных плесневых грибов; дополнительное обогащение 10 % овечьей кровью расширяет применение среды для выделения системных патогенных грибов.

Комплект поставки

• Селективный агар ХК с сердечно-мозговой вытяжкой HiMedia M209-100G — фасовка, указанная в названии товара: уп/500 гр.