Селективный агар ХК с сердечно-мозговой вытяжкой HiMedia M209-100G (уп/500 гр)

Диагностическая селективная питательная среда Селективный агар ХК с сердечно-мозговой вытяжкой HiMedia M209-100G (производство HiMedia) предназначена для выделения прихотливых патогенных грибов. Применяется для культивирования Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis и других видов из образцов, сильно загрязненных бактериями и сапрофитными грибами.

Принцип измерения

Среда Brain Heart CC Agar разработана в соответствии с методиками Ajello et al. и McDonough et al. для селективного выделения патогенных грибов.

Механизм селективности основан на использовании антибиотиков:

• Хлорамфеникол: антибиотик широкого спектра, подавляющий рост большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий.
• Циклогексимид: ингибирует рост большинства сапрофитных плесеней, что облегчает выделение патогенных грибов.

Питательная основа включает порошок инфузии (эквивалент инфузии мозга теленка), пептон B (эквивалент инфузии сердца говяжьего) и протеоз-пептон, которые обеспечивают необходимый набор нутриентов для роста требовательных микроорганизмов. Декстроза служит источником углеводов, а гидрогенифосфат натрия выполняет функцию буфера.

Область применения

Среда используется для анализа клинических образцов, включая патологический материал (например, соскобы кожи).

Особенности использования

• Для выделения системных грибов, плохо растущих на необогащенных средах, допускается добавление 10 % овечьей крови.
• Добавление гентамицина в концентрации 50 мкг/мл повышает селективность среды.
• При добавлении крови среда становится пригодной для выделения тканевой фазы Histoplasma capsulatum и других патогенов, включая Coccidioides immitis.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 52,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C. Избегайте чрезмерного перегрева, так как это может снизить селективность среды.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

• Для выделения грибов из загрязненных проб рекомендуется использовать одновременно селективную и неселективную среды.
• Инкубация проводится при температуре 25–30 °C.
• При поиске возбудителей системных микозов используют два набора сред: один инкубируют при 23–30 °C, дублирующий набор — при 35–37 °C.
• Контроль роста осуществляется в течение как минимум одной недели.

Меры предосторожности:

• Циклогексимид высокотоксичен; следует избегать контакта с кожей и вдыхания аэрозолей.
• При работе с Histoplasma capsulatum необходимо соблюдать крайнюю осторожность во избежание распространения инфекционных спор; исследование культур должно проводиться в закрытом кабинете с фильтрацией воздуха.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция 5,25 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 25–35 °C в течение 40–96 часов (для видов Trichophyton срок инкубации составляет 1–2 недели).

*Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранить сухую и приготовленную среду при температуре 2–8 °C.
• После вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования из-за гигроскопичности продукта.
• Хранить в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Использовать строго до истечения срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.

Ограничения

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.