HiMedia M2086I-500G Солевой питательный агар для Vibrio

Сухая питательная агаровая среда HiMedia M2086I-500G Солевой питательный агар для Vibrio выпускается в виде порошка массой 500 г. Среда предназначена для выделения видов Vibrio из пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды; готовую среду хранят при 20–30 °C.

Назначение и область применения

Среда предназначена для выделения видов Vibrio из пищевых продуктов, кормов для животных, а также образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 21872-1:2017.

Тип образца: пищевые продукты, корма для животных, образцы окружающей среды из зон производства и обращения пищевой продукции.

Состав

Формула на 1 л среды:

* Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Конечный pH после стерилизации при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio сравнительно легко выделяются из клинического материала и образцов окружающей среды, однако для роста некоторых видов могут потребоваться факторы роста и/или витамины. Среду можно сделать селективной для Vibrio добавлением соответствующих селективных агентов.

Среда рекомендована для выделения видов Vibrio из пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции в соответствии с ISO 21872-1:2017.

Vibrio parahaemolyticus является одной из основных причин бактериальной диареи, связанной с употреблением загрязнённых пищевых продуктов. Vibrio furnissii — несолелюбивый вид Vibrio, который не способен расти в средах с концентрацией хлорида натрия более 5–6 % и может расти в средах без NaCl.

Пептон и экстракт HM обеспечивают бактерии необходимыми азотсодержащими соединениями, углеродом, витаминами и некоторыми микроингредиентами, требуемыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. В качестве альтернативы среду можно разлить в пробирки для приготовления скошенного агара.

Методика проведения анализа по ISO 21872-1:2017

Первичное селективное обогащение

1. Внесите 25 г или 25 мл исследуемой порции в 225 мл щелочной солевой пептонной воды (ASPW).
2. Инкубируйте в течение 6 ч ± 1 ч.
3. Температуру инкубации выбирайте с учётом целевого вида Vibrio и состояния продукта — глубоко замороженный или свежий:
   • для Vibrio parahaemolyticus и Vibrio furnissii: 41,5 ± 1 °C для свежих продуктов и 37 ± 1 °C для глубоко замороженных, высушенных или солёных продуктов;
   • для Vibrio vulnificus: 37 ± 1 °C для всех состояний продукта.

Вторичное селективное обогащение

1. Перенесите 1 мл культуры из первичного обогатительного бульона в 10 мл ASPW.
2. Не перемешивайте образец перед отбором аликвоты.
3. Инкубируйте ASPW при 41,5 °C ± 1 °C и/или 37 °C ± 1 °C в течение 18 ч ± 1 ч.

Выделение и идентификация

1. Перенесите культуры, полученные в ASPW, на агар TCBS (M189).
2. Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч для формирования хорошо изолированных колоний.
3. На второй селективной среде исследуйте наличие колоний, которые по своим характеристикам могут рассматриваться как возможные изоляты V. parahaemolyticus, V. vulnificus и/или V. furnissii.

Подтверждение

Подтверждение проводят методами молекулярной полимеразной цепной реакции (ПЦР) и/или биохимическими методами.

Для биохимического исследования:

1. Инокулируйте отобранные колонии на поверхность чашек с солевым питательным агаром M2086I.
2. Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч.
3. Из полученных изолированных колоний приготовьте посевы в ар­гинин-дегидролазный солевой бульон M1644I и/или лизин-декарбоксилазный солевой бульон (LDC) M1778I.
4. Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M2086I-500G
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Концентрация при приготовлении: 33,0 г/1000 мл
• Конечный pH после стерилизации при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Контроль качества

Внешний вид и свойства приготовленной среды

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,3 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,2 ± 0,2; диапазон 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.