HiMedia M2086I-500G Солевой питательный агар для Vibrio

Сухая питательная среда HiMedia M2086I-500G «Солевой питательный агар для Vibrio» для изоляции видов Vibrio из пищевых продуктов и проб окружающей среды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 21872-1:2017 (E).

Область применения

Среда рекомендуется для выделения видов Vibrio из пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды в зонах производства и обработки пищевой продукции. Применяется в качестве подтверждающей среды при биохимическом тестировании изолятов.

Принцип измерения

Пептон и экстракт HM обеспечивают необходимые азотистые соединения, углерод, витамины и микроэлементы, необходимые для роста бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

Среда позволяет выделить как галофильные виды, так и нехалофильные, такие как Vibrio furnissii, который способен расти в средах без NaCl или с его концентрацией не более 5–6 %.

Методика проведения анализа

Процедура основана на стандарте ISO 21872-1:2017 (E).

Подготовка среды

1. Суспендируйте 33,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри. Также возможно приготовление среды в пробирках для создания скошенных агаров.

Этапы анализа

1. Первичное селективное обогащение: 25 г или 25 мл пробы помещают в 225 мл щелочной пептонной воды (ASPW). Время инкубации — 6 $\pm$ 1 ч. Температура зависит от целевого вида и состояния продукта:
   • V. parahaemolyticus и V. furnissii: 41,5 $\pm$ 1 °C для свежих продуктов; 37 $\pm$ 1 °C для глубоко замороженных, сухих или соленых продуктов.
   • V. vulnificus: 37 $\pm$ 1 °C для всех видов продуктов.
2. Вторичное селективное обогащение: 1 мл культуры из первичного бульона переносят в 10 мл ASPW (без перемешивания пробы перед отбором). Инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C и/или 37 $\pm$ 1 °C в течение 18 $\pm$ 1 ч.
3. Изоляция и идентификация: Культуры из ASPW переносят на агар TCBS (M189), инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч для получения изолированных колоний.
4. Подтверждение: Проводится с помощью ПЦР или биохимических методов. Для биохимического тестирования отобранные колонии инокулируют на поверхность чашек с солевым питательным агаром (M2086I) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч. Далее изоляты переносят в солевой бульон с аргинин-дигидролазой (M1644I) и/или солевой бульон с L-лизин-декарбоксилазой (LDC) (M1778I), инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH после стерилизации (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Вес нетто: 500 г

Дополнительные параметры:

Контроль качества и эффективность

Внешний вид и свойства

• Вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция 3,3 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C: pH 7,2 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

1. Для полного дифференцирования данных видов между собой и от непатогенных Vibrio spp. требуются дополнительные биохимические тесты.
2. Индивидуальные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
3. При работе с образцами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая правила микробиологической безопасности.
4. Загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.