HiMedia M2085-500G Основа агара Мартина-Льюиса

Питательная среда HiMedia M2085-500G Основа агара Мартина-Льюиса — селективная и обогащённая основа для выделения и культивирования видов Neisseria из клинических образцов. Применяется при исследовании образцов со смешанной микрофлорой из зева, влагалища, прямой кишки и уретры; перед использованием требует добавления гемоглобина, витаминной ростовой добавки и селективной антибиотической добавки.

Назначение

Селективная и обогащённая питательная среда рекомендована для выделения и культивирования видов Neisseria из клинических образцов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

# Эквивалент мясного пептона.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение: животного происхождения
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)

Методика приготовления

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 480 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 10 г гемоглобина к 500 мл дистиллированной воды.
6. Отдельно стерилизуйте раствор гемоглобина автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
7. Охладите раствор гемоглобина до 45–50 °C.
8. Асептически добавьте восстановленное содержимое одного флакона витаминной ростовой добавки Vitamino Growth Supplement (FD025) и одного флакона добавки Vanclo T Supplement (FD028).
9. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Большинство гонококковых инфекций представляют собой неосложнённые инфекции нижних отделов половых путей, вызванные прямым инфицированием цилиндрического эпителия слизистых оболочек. Возбудителем гонококковых инфекций является Neisseria gonorrhoeae. Большинство штаммов Neisseria имеют сложные требования к условиям роста; некоторые штаммы могут обладать высокой чувствительностью к жирным кислотам, поэтому в питательную среду необходимо вводить растворимый крахмал.

Carpenter и Morton сообщили об улучшенной среде для выделения гонококков в течение 24 ч. Позднее была продемонстрирована эффективность среды GC с добавлением гемоглобина и концентрата дрожжей для выделения гонококков. Впоследствии среда Thayer–Martin была разработана для первичного выделения Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis из образцов со смешанной микрофлорой, полученных из зева, влагалища, прямой кишки и уретры. Thayer и Martin использовали ванкомицин, колистин и нистатин. Martin и Lester добавили антибиотик триметоприм, чтобы сделать среду селективной.

Триптон и пептон HM обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые питательные вещества для роста требовательных микроорганизмов. Фосфаты буферируют среду. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Для культивирования требовательных микроорганизмов среду следует дополнять необходимыми факторами роста, которые преимущественно содержатся в дрожжевом экстракте (FD027). Дрожжевой экстракт может быть заменён химически определённой добавкой с необходимыми факторами роста, доступными из дрожжевого экстракта, — витаминной ростовой добавкой в двухкомпонентной упаковке Vitamino Growth Supplement (FD025). X-фактор, необходимый для роста требовательных видов Haemophilus, поступает из гемоглобина (FD022). Селективная добавка подавляет сопутствующие бактерии.

Тип образцов

Клинические образцы со смешанной микрофлорой, полученные из:

• зева;
• влагалища;
• прямой кишки;
• уретры.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на данной среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователям рекомендуется валидировать среду для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, с учётом индивидуальных требований применения.
3. Некоторые штаммы Neisseria gonorrheae могут подавляться антибиотиками.
4. Параллельно необходимо использовать обогащённую неселективную среду.
5. Для подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Эксплуатационные характеристики и оценка

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления гемоглобина и добавок: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадного цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают при наличии 5–10 % диоксида углерода (CO₂) и относительной влажности 70 %, с добавлением стерильного 2%-ного гемоглобина (FD022), витаминной ростовой добавки Vitamino Growth Supplement (FD025) и одного флакона добавки Vanclo T Supplement (FD028), после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.