HiMedia M2071-100G Основа селективного MRS агара с клиндамицином
Питательная среда HiMedia M2071-100G Основа селективного MRS агара с клиндамицином животного происхождения, рассчитанная на приготовление 1 л среды из 65,15 г порошка и соответствующая спецификациям ISO 20128:2006. Основа предназначена для селективного культивирования молочнокислых бактерий из пищевых продуктов и молока; некоторые штаммы Lactobacillus могут демонстрировать слабый рост из-за селективных свойств среды.
Описание
Питательная среда HiMedia M2071-100G Основа селективного MRS агара с клиндамицином животного происхождения, рассчитанная на приготовление 1 л среды из 65,15 г порошка и соответствующая спецификациям ISO 20128:2006. Основа предназначена для селективного культивирования молочнокислых бактерий из пищевых продуктов и молока; некоторые штаммы Lactobacillus могут демонстрировать слабый рост из-за селективных свойств среды.
Назначение
Основа селективного MRS-агара HiMedia M2071-100G применяется для выделения и количественного определения предполагаемых Lactobacillus acidophilus из молочных и пищевых продуктов. Состав среды соответствует спецификациям ISO 20128:2006.
Среда разработана для селективного культивирования молочнокислых бактерий из:
- пищевых продуктов;
- молока и молочных продуктов;
- образцов из ротовой полости;
- других исследуемых источников.
Выделенные на MRS-агаре лактобациллы необходимо дополнительно подтверждать биохимическими методами.
Состав
Расчётное содержание компонентов на 1 л среды:
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Триптон | 10,000 |
| Пептон HM B | 10,000 |
| Дрожжевой экстракт | 5,000 |
| Декстроза (глюкоза) | 20,000 |
| Твин 80 (полисорбат 80) | 1,000 |
| Дикалия гидрофосфат | 2,000 |
| Триаммоний цитрат | 2,000 |
| Тригидрат ацетата натрия | 5,000 |
| Гептагидрат сульфата магния | 0,200 |
| Тетрагидрат сульфата марганца | 0,050 |
| Агар | 12,000 |
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.
Эквивалент мясного экстракта.
Конечный pH: 6,5 ± 0,2 при 25 °C.
Принцип действия и интерпретация результатов
Основа MRS-селективного агара разработана в соответствии со спецификацией ISO 20128 для подсчёта предполагаемых Lactobacillus acidophilus в молочных продуктах. Среда для лактобацилл MRS основана на рецептуре de Man, Rogosa и Sharpe с небольшими изменениями.
Функции компонентов среды:
- протеозопептон и пептон HM B поставляют азотистые и углеродистые соединения;
- дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B;
- декстроза является сбраживаемым углеводом и источником энергии;
- полисорбат 80 поставляет жирные кислоты, необходимые для метаболизма лактобацилл;
- ацетат натрия и цитрат аммония подавляют стрептококки, плесневые грибы и многие другие микроорганизмы;
- сульфат магния и сульфат марганца поставляют ионы, необходимые для размножения лактобацилл;
- фосфаты обеспечивают буферное действие среды;
- клиндамицин и ципрофлоксацин способствуют устранению сопутствующей микрофлоры.
Лактобациллы являются микроаэрофильными микроорганизмами и обычно требуют послойного нанесения для аэробного культивирования на плотных средах. После застывания среды на поверхность наливают дополнительный слой неинокулированного MRS-агара, формируя послойную чашку.
Приготовление среды
- Приостановить 65,15 г порошкообразной обезвоженной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагреть до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладить среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавить восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки «Ципрофлоксацин — клиндамицин» FD346.
- Тщательно перемешать.
- Разлить среду в стерильные чашки Петри.
Образцы и обращение с ними
Тип образца: пищевые продукты и молочные продукты.
Для пищевых и молочных образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим руководствам.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Ограничения применения
- Из-за селективных свойств среды некоторые штаммы Lactobacillus могут демонстрировать слабый рост.
- Для подтверждения идентификации необходимо проводить дополнительную биохимическую идентификацию.
- Лактобациллы, выделенные на MRS-агаре, требуют дальнейшего биохимического подтверждения.
Контроль качества
Внешний вид
Кремовый или светло-жёлтый однородный сыпучий порошок.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
В чашках Петри образуется гель от средне- до тёмно-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
Реакция среды
Реакция 6,51%-ного водного раствора при 25 °C:
- pH: 6,5 ± 0,2.
Диапазон pH
pH: 6,30–6,70.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч или дольше в атмосфере с 5 % CO₂.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление |
|---|---|---|---|
| Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 (00098*) | 50–100 | обильный | ≥50 % |
| Lactobacillus fermentum ATCC 9338 | 50–100 | обильный | ≥50 % |
| Lactobacillus leichmannii ATCC 7830 | 50–100 | обильный | ≥50 % |
| Lactobacillus plantarum ATCC 8014 | 50–100 | обильный | ≥50 % |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | ≥10⁴ | ингибирование | 0 % |
| Bacillus cereus ATCC 11778 (00001*) | ≥10⁴ | ингибирование | 0 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Рабочие характеристики
Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: M2071-100G
- Назначение изделия: основа селективного MRS-агара с клиндамицином
- Физическая форма: порошок
- Вес: 100 г
- Происхождение: животное
- Тип продукта: стандартный
- Тип упаковки: HDPE
- Температура хранения продукта: 10–30 °C
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
- Конечный pH: 6,5 ± 0,2 при 25 °C
- Рабочая концентрация для приготовления среды: 65,15 г/л
Хранение и срок годности
Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, поскольку гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Неправильное хранение может вызвать комкование продукта.
Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования ёмкость необходимо плотно закрывать. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.
Меры предосторожности
Перед открыванием контейнера прочитать этикетку.
При работе с продуктом, образцами и культурами использовать:
- защитные перчатки;
- защитную одежду;
- защиту глаз;
- защиту лица.
При обращении с образцами и культурами соблюдать надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности, установленные применяемыми руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Утилизация
Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.
При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.
Сравнительный технический контекст
В отличие от стандартного неселективного MRS-агара, состав M2071 предусматривает добавление селективной добавки FD346 с клиндамицином и ципрофлоксацином для подавления сопутствующей микрофлоры.
Комплект поставки
- Основа селективного MRS-агара с клиндамицином HiMedia M2071-100G, 100 г.
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 100г |
|---|
