Питательная среда HiMedia M2065-500G Основа селективного HiCrome агара для лактобацилл производства HiMedia — порошковая основа для селективного выделения и дифференциации Lactobacillus хромогенным методом. Применяется для анализа молока и молочных продуктов; селективность обеспечивается добавлением селективной добавки Cip (FD345), подавляющей сопутствующие бактерии.

Назначение

Основа рекомендуется для селективного выделения и дифференциации Lactobacillus из смешанных культур хромогенным методом.

Тип образцов

• Молочные образцы: молоко и молочные продукты.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Эквивалент мясного экстракта

Эквивалент молочного белка

Принцип действия и интерпретация результатов

Lactobacillus — род грамположительных, факультативно-анаэробных или микроаэрофильных палочковидных бактерий, не образующих спор. Лактобациллы относятся к основной группе молочнокислых бактерий. Поскольку молочнокислые бактерии всё чаще разрабатываются и выпускаются в смешанных формах пробиотиков, требуется методика подсчёта каждого вида молочнокислых бактерий в смеси.

Пептон и экстракт HM обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Маннитол служит сбраживаемым углеводом; его ферментацию выявляют по реакции фенолового красного. M-протеин способствует выявлению активности гидролиза казеина. Хромогенная смесь расщепляется ферментом β-глюкозидазой, в результате чего формируются колонии от зеленовато-синих до синих оттенков. Для селективного выделения Lactobacillus добавляют селективную добавку Cip (FD345), подавляющую сопутствующие бактерии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 54,22 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки Cip (FD345).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обработка образцов

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,42 % при 25 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–30 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки Cip (FD345) и использованием 5 % CO₂.

• — соответствующие номера WDCM.
  Lactobacillus paracasei ранее был известен как Lactobacillus casei.
  Bacillus spizizenii ранее был известен как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды.
• Производитель: HiMedia.
• Тип продукта: HiCrome™.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: животного происхождения.
• Материал упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 500 г.
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.
• Температура стерилизации: 121 °C.
• Время стерилизации: 15 мин.
• Давление при автоклавировании: 15 фунтов/дюйм², приблизительно 0,103 МПа.
• Температура охлаждения перед внесением добавки: 45–50 °C.
• Дозировка порошка: 54,22 г на 1000 мл воды.

Условия хранения и срок годности

• Порошковую среду хранить при температуре 15–25 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать ёмкость.
• При получении продукта хранить его при температуре 15–25 °C.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении условий хранения, указанных на этикетке.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде вариабельные характеристики роста.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований применения.
3. Возможны небольшие вариации окраски в зависимости от утилизации субстрата микроорганизмом.
4. Для подтверждения результата необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный технический контекст

В отличие от неспецифических питательных сред, HiMedia M2065-500G сочетает хромогенную дифференциацию колоний Lactobacillus по окраске с селективным подавлением сопутствующей микрофлоры добавкой Cip (FD345).

Совместимые компоненты

• Селективная добавка Cip (FD345), регидратированное содержимое одного флакона на приготовленную среду.

Комплект поставки

• Основа селективного HiCrome агара для лактобацилл, порошок, 500 г.