HiMedia M2064-500G Основа HiCrome Coliconfirm бульона

Питательная среда HiMedia M2064-500G Основа HiCrome Coliconfirm бульона — порошковая основа массой 500 г для приготовления селективной среды. Применяется для обнаружения Escherichia coli и других общих колиформных бактерий в пробах воды методом мембранной фильтрации; приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Основа HiCrome Coliconfirm бульона предназначена для одновременного обнаружения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды методом мембранной фильтрации.

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiCrome™
• Форма: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для получения заданных показателей эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,00 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация результатов

Образец воды фильтруют через мембрану, затем мембрану помещают на абсорбирующую прокладку, насыщенную приготовленной средой, и инкубируют при 35 ± 5 °C в течение 24 ч в герметично закрытых чашках Петри.

Триптон обеспечивает азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые питательные вещества. Дрожжевой экстракт служит источником витаминов. Лактоза является ферментируемым углеводом. Фосфаты выполняют буферную функцию. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Фермент β-глюкуронидаза, продуцируемый E.coli, использует хромогенный субстрат с образованием колоний сине-фиолетового цвета. Колиформные бактерии, отличные от Escherichia coli, восстанавливают 2,3,5-трифенилтетразолий хлорид (TTC), в результате чего колонии окрашиваются в красный цвет. Различие окраски позволяет интерпретировать результаты без дополнительного подтверждения. Метиленовый синий и селективная добавка ECC обеспечивают селективность среды. Неколиформные микроорганизмы обычно образуют колонии белого цвета.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 17,43 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое селективной добавки ECC Selective Supplement (FD344) и 10 мл 1%-ного раствора TTC (FD057).
6. Тщательно перемешайте.
7. В асептических условиях внесите необходимое количество бульона — от 2 до 5 мл — на стерильную абсорбирующую ватную прокладку или стерильную фильтровальную бумагу для насыщения.
8. Используйте питательную прокладку в течение 24 ч после насыщения.
9. Профильтруйте пробу воды через мембрану.
10. Поместите мембрану на насыщенную питательную прокладку.
11. Инкубируйте в герметично закрытой чашке Петри при 35 ± 5 °C в течение 24 ч.
12. Интерпретируйте результат по окраске колоний: Escherichia coli обычно образует синие колонии, другие колиформные бактерии — красные, неколиформные микроорганизмы — белые.

Тип образца

• Образец: вода

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: кремовый, прозрачный или слегка опалесцирующий раствор; возможно наличие небольшого осадка
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 1,74 % при 25 °C
• pH: 6,80–7,20
• pH по указанной реакции: 7,0 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 34,5–35,5 °C в течение 24 ч.

Звёздочкой обозначены соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого продукта: 15–25 °C, в плотно закрытой ёмкости
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E.coli, однако некоторые штаммы E.coli могут быть отрицательными по этому признаку.
2. Из-за высокой селективности среды некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост вследствие различий в пищевых потребностях.
3. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные для работы с биологическими образцами. Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы утилизируйте в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы согласно действующим методикам лабораторной работы.

Сравнительный технический контекст

Среда обеспечивает дифференциацию *