HiMedia M2062I-500G HiCrome агар для выделения Cronobacter (CCI)

Хромогенный агар HiMedia M2062I-500G HiCrome для выделения Cronobacter (CCI) предназначен для изоляции и идентификации Cronobacter sakazakii из пищевых продуктов. Состав и рабочие характеристики среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 22964:2017.

Принцип измерения

Среда основана на использовании хромогенного субстрата (5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид), который специфически расщепляется C. sakazakii, что приводит к образованию синих или сине-зелёных колоний. Другие микроорганизмы, не способные расщеплять данный субстрат, образуют бесцветные колонии.

Компоненты среды обеспечивают следующие функции:

• Триптон и дрожжевой экстракт: источники азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Дезоксихолат натрия: подавляет рост сопутствующей грамположительной флоры.

Область применения

Согласно ISO 22964:2017, среда применяется для анализа:

• Пищевых продуктов и ингредиентов, предназначенных для потребления человеком и кормления животных.
• Образцов окружающей среды в зонах производства и переработки пищевых продуктов.

Методика проведения анализа

Процедура анализа согласно ISO 22964:2017 включает следующие этапы:

1. Неселективное предварительное обогащение: Образцы (10 г или 10 мл в 90 мл среды) помещают в буферизованную пептонную воду (BPW, M1494I) и инкубируют при 34 °C и 38 °C в течение 18 ± 2 часов.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл обогащенной культуры из BPW инокулируют в селективный бульон для Cronobacter (CSB) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов.
3. Идентификация на хромогенном агаре: 10 мкл селективно обогащенной культуры из CSB (M1786I) высевают на агар CCI (M2062I) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов.
4. Подтверждение: Типичные колонии отбирают с хромогенного агара, очищают на неселективной среде (например, TSA) и проводят биохимическую характеристику.

Приготовление среды

1. Растворить 32,4 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH после стерилизации (при 25 °C): 7,3 ± 0,2.

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого или розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,10–7,50 (для 3,24% в/в водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Ограничения и предостережения

• Возможны незначительные вариации цвета в зависимости от продукции ферментов микроорганизмом и использования субстрата.
• Различные штаммы могут демонстрировать разные паттерны роста.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• При работе со средой следует соблюдать правила микробиологической безопасности, использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, очки, защитную одежду).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом проветриваемом месте. Из-за гигроскопичности продукта неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.