HiMedia M2060-500G Основа триптозно-сывороточного агара

Сухая питательная среда HiMedia M2060-500G Основа триптозно-сывороточного агара предназначена для рутинного культивирования и выделения группы Mycoplasma mycoides из клинических и не клинических образцов. Основа используется для приготовления агаровой среды с добавлением глицерина, свиной сыворотки и селективной добавки; хранение продукта предусмотрено при 10–30 °C в плотно закрытой сухой таре.

Назначение

Основа триптозно-сывороточного агара рекомендована для рутинного культивирования и выделения группы Mycoplasma mycoides из клинических и не клинических образцов.

Типы образцов:

• клинические образцы: мокрота;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,50 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 5 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки PDTY (FD334).
6. Добавьте 108 мл свиной сыворотки RM10415, предварительно инактивированной при 56 °C в течение не более 30 мин.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и интерпретация

Группа Mycoplasma mycoides включает:

• Mycoplasma mycoides subsp. capri;
• Mycoplasma mycoides subsp. mycoides — мелкоколониальный вариант (SC);
• Mycoplasma mycoides subsp. mycoides — крупноколониальный вариант (LC);
• бычью серогруппу 7;
• Mycoplasma capricolum subsp. capricolum (Mcc);
• Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae (Mccp).

Все перечисленные группы являются патогенными; основными хозяевами служат крупный рогатый скот, козы и овцы.

Триптозно-сывороточный агар первоначально разработан Gourlay для культивирования Mycoplasma mycoides var. mycoides. Имеются данные о культивировании микоплазм в бульоне или агаровой среде Gourlay с содержанием агара 1 % — модифицированном триптозном бульоне Newings, разработанном Gourlay в 1964 году. Если не указано иное, среда содержит ацетат таллия в концентрации 0,04 % и ампициллин в концентрации 0,4 мг/мл; культивирование проводят при 37 °C в атмосфере с содержанием CO₂ 5 %.

Рост микоплазм также поддерживают другие модификации бульонных и агаровых сред, включая VFG, WJB, модифицированную среду Фрииса, среды Хэйфлика и среды PPLO.

Компоненты среды и все добавляемые компоненты не должны содержать токсичных веществ даже в небольших количествах. Для хорошего роста многим микоплазмам требуется сыворотка; добавление антибиотика необходимо для подавления роста контаминирующих микроорганизмов. Большинство видов микоплазм являются аэробными или факультативно-анаэробными, некоторые — микроаэрофильными. Отдельные анаэробные сапрофитные микоплазмы лучше растут при 22–35 °C, тогда как патогенные штаммы растут при 35 °C.

Функции компонентов:

• триптоза служит источником азотистых и углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других питательных веществ, необходимых для роста;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• декстроза служит источником энергии;
• дрожжевой экстракт обеспечивает витаминами, особенно витаминами группы B;
• глицерин служит источником углерода;
• гидрофосфат натрия двузамещённый выполняет функцию буферной соли;
• пенициллин G и ацетат таллия подавляют сопутствующую микрофлору;
• свиная сыворотка обеспечивает хороший рост микроорганизмов.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно установленным методическим указаниям.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно установленным методическим указаниям.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно методическим указаниям и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Продукт предназначен для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими методическими указаниями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Компоненты среды и все добавляемые компоненты не должны содержать токсичных веществ даже в небольших количествах.
2. Для подтверждения результата необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Ожидаемые характеристики и оценка эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 10 % CO₂ с добавлением свиной сыворотки RM10415, инактивированной при 56 °C в течение не более 30 мин, и селективной добавки PDTY (FD334), после инкубации при 22–35 °C в течение 48 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель: M2060-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: сухой порошок
• Масса: 500 г
• Температура хранения: 10–30 °C
• Среда после приготовления: опалесцирующий гель светло-янтарного цвета
• Условия культивирования для контроля культуральных характеристик: 22–35 °C, 48 ч, в присутствии 10 % CO₂
• Условия культивирования, описанные для отдельных патогенных штаммов: 35 °C
• Условия культивирования, описанные для отдельных анаэробных сапрофитных микоплазм: 22–35 °C
• Атмосфера для метода Gourlay: 5 % CO₂ при 37 °C

Хранение и срок годности

• Храните продукт при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Храните продукт в сухом, проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности