HiMedia M2058-500G HiCrome Coliconfirm агар

Хромогенный селективный агар HiMedia M2058-500G HiCrome Coliconfirm для изоляции и идентификации E. coli и колиформ из проб воды. Применяется методом мембранной фильтрации; позволяет дифференцировать микроорганизмы по цвету колоний без проведения дополнительных подтверждающих тестов.

Принцип измерения и интерпретация

Метод основан на использовании мембранной фильтрации: бактерии задерживаются на поверхности фильтра с определенным размером пор, после чего мембрана контактирует с питательной средой. Диффузия питательных веществ через поры стимулирует рост микроорганизмов в виде поверхностных колоний.

Механизмы идентификации:

• Триптон и факторы роста обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты и витамины.
• Фосфатные буферы стабилизируют pH среды.
• Селективные агенты подавляют рост грамположительных и других сопутствующих бактерий.
• Хромогенная смесь позволяет выявлять организмы, положительные по β-глюкуронидазе, которые образуют колонии синего цвета.
• Колиформы (кроме Escherichia coli) восстанавливают TTC (2,3,5-трифенилтетразолиумхлорид), что приводит к образованию колоний красного цвета.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 33,97 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона регидратированного раствора TTC 1% (FD057).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Тип образца: Пробы воды.
• Сбор и обработка: Сбор и обработка проб должны проводиться в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.
• Утилизация: Загрязненные материалы подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Вес упаковки: 500 г
• Форма выпуска: Порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: Животное

Контроль качества

• Внешний вид: Гомогенный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: Плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: Светло-голубой, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• pH водного раствора (3,4 % w/v при 25 °C): 7,00–7,40 (номинал 7,2 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются на мембранном фильтре или чашке Петри после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Среда основана на определении фермента β-глюкуронидазы. Около 97 % штаммов E. coli являются β-глюкуронидаза-положительными и дают синий цвет.
2. Некоторые виды Salmonella и Shigella также могут проявлять активность β-глюкуронидазы.
3. Окончательная идентификация должна быть подтверждена биохимическими тестами.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: При температуре 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.

Меры предосторожности

При работе со средой и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте стандартные правила микробиологической лабораторной практики.