Питательная агаризованная среда HiMedia M2058-500G HiCrome Coliconfirm агар с селективной и хромогенной смесью для выявления кишечной палочки и колиформных бактерий. Среда предназначена для селективного выделения и идентификации E. coli и колиформных бактерий в пробах воды методом мембранной фильтрации, при этом окончательная идентификация выполняется биохимическими тестами.

Назначение и область применения

Среда предназначена для:

• селективного выделения E. coli и колиформных бактерий;
• идентификации E. coli и колиформных бактерий по окраске колоний;
• анализа проб воды методом мембранной фильтрации.

Тип образца: пробы воды.

Масса: 500 г.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Происхождение компонентов: животное.

Тип продукта: HiCrome™.

Физическая форма: порошок.

Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).

Принцип действия и интерпретация результатов

Бактерии удаляются из жидкостей пропусканием пробы через фильтры с настолько малым размером пор, что микроорганизмы задерживаются на поверхности мембраны. Мембранная фильтрация позволяет быстро пропускать под давлением сравнительно большие объёмы воды, не допуская прохождения содержащихся в воде бактерий.

Питательные вещества задерживаются на поверхности мембраны. После переноса мембраны на подходящую питательную среду растворённые питательные компоненты диффундируют через поры мембраны, обеспечивая рост микроорганизмов в виде поверхностных колоний, которые можно подсчитать.

Escherichia coli относится к семейству Enterobacteriaceae и является нормальной микрофлорой кишечного тракта человека и различных животных. Большинство штаммов E. coli не вызывает заболеваний желудочно-кишечного тракта, однако отдельные группы E. coli могут быть причиной угрожающей жизни диареи и тяжёлых нарушений здоровья. Для анализа воды важно выявлять E. coli и общее количество колиформных бактерий.

Триптон и факторы роста обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Фосфатные буферные компоненты стабилизируют реакцию среды. Селективные компоненты подавляют рост грамположительных бактерий и другой сопутствующей микрофлоры.

Хромогенная смесь обеспечивает выявление микроорганизмов, положительных по β-глюкуронидазе: такие организмы формируют колонии синего цвета. Колиформные бактерии, за исключением Escherichia coli, восстанавливают TTC — хлорид 2,3,5-трифенилтетразолия — и образуют колонии красного цвета. Различие окраски позволяет интерпретировать результат без дополнительного подтверждения на этапе первичного анализа.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,97 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона 1%-ного раствора TTC FD057.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо простерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила безопасной работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Метод основан на выявлении фермента β-глюкуронидазы. Около 97 % штаммов E. coli являются β-глюкуронидаза-положительными и формируют колонии синего цвета.
2. Некоторые другие виды Salmonella и Shigella также могут обладать активностью β-глюкуронидазы.
3. Окончательную идентификацию необходимо выполнять биохимическими тестами.

Контроль качества

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Внешний вид: однородный, свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-синего цвета.

Реакция: реакция 3,4%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают на мембранном фильтре или в чашке после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

— ранее известен как Enterobacter aerogenes.

* — соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 15–25 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Из-за гигроскопичности порошка необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении,