HiMedia M2056-500G Модифицированная основа селективного HiCrome ECC агара

Питательная среда HiMedia M2056-500G Модифицированная основа селективного HiCrome ECC агара производства HiMedia предназначена для одновременного выявления Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов. Основа содержит хромогенную смесь и лаурилсульфат натрия, а приготовленную среду стерилизуют автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин.

Назначение

Основа рекомендована для выявления Escherichia coli и колиформных бактерий в образцах воды и пищевых продуктов, включая молочные продукты.

Тип образца:

• пищевые и молочные продукты;
• вода.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Назначение изделия: основа
• Происхождение: животное
• Тип продукта: HiCrome™
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 39,30 г сухой основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный селективный агар HiCrome ECC предназначен для одновременного выявления Escherichia coli и общего количества колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата:

• фермент β-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов с образованием колоний лососево-красного цвета;
• фермент β-D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет X-глюкуронид — второй хромоген;
• колонии E. coli приобретают тёмно-синюю или фиолетовую окраску вследствие расщепления обоих хромогенов.

Добавление L-триптофана улучшает реакцию на индол и повышает надёжность выявления. Пептон обеспечивает азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые для роста микроорганизмов питательные вещества. Пируват натрия служит фактором роста, сорбитол является сбраживаемым углеводом, а фосфаты выполняют буферную функцию. Формула среды способствует восстановлению и быстрому росту даже сублетально повреждённых колиформных бактерий. Лаурилсульфат натрия подавляет грамположительные бактерии.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. Некоторые штаммы E. coli могут образовывать колонии лососевого цвета при отсутствии фермента β-глюкуронидазы.
2. Интенсивность окраски колоний E. coli и колиформных бактерий зависит от количества фермента, вырабатываемого микроорганизмом.
3. Некоторые виды Shigella и Salmonella являются β-глюкуронидазоположительными и могут образовывать светло-синие колонии.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель, образующийся в чашках Петри.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,93 % масс./об. при 25 °C; pH 7,00 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения: # — ранее известен как Enterobacter aerogenes; * — соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 15–25 °C.
• Условия хранения сухой основы: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

На момент получения продукта хранить при 15–25 °C.

Требования безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами. Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Контрольные культуры и оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.