Сухая питательная среда HiMedia M2051-100G Питательный агар с трипановым синим для обнаружения и количественного определения аэробных спорообразующих бактерий в пробах воды методом мембранной фильтрации. Применяется в соответствии с методиками APHA; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Определенные роды бактерий, часто встречающиеся в почве и воде, образуют эндоспоры. В благоприятных условиях питательной среды эндоспоры легко превращаются в вегетативные клетки.

Методика анализа предполагает термическую обработку пробы воды, при которой вегетативные клетки погибают, а аэробные споры остаются жизнеспособными. Затем проба фильтруется через мембранный фильтр, который помещается на поверхность агара.

Пептон и HM-пептон B обеспечивают необходимые азотистые соединения, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и микроэлементы, необходимые для роста бактерий. Трипановый синий добавляется для придания цветного фона мембране, что позволяет легко визуализировать колонии аэробных эндоспор.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте среду: суспендируйте 23,02 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
5. После фильтрации пробы воды через мембрану поместите фильтр на поверхность агара.
6. Инкубируйте при температуре 35 $\pm$ 0,5 °C в течение 24 $\pm$ 2 часов.
7. Для выявления внутриклеточного образования эндоспор возможна дальнейшая инкубация до 5–7 суток.
8. Подсчитайте количество колоний как аэробные эндоспоры. Колонии должны быть каталазоположительными.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Эквивалент мясного экстракта.

Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2.

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: светло-желтый или голубой однородный свободно текущий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: в чашках Петри образуется светло-голубой прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 2,3 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 6,8 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35 $\pm$ 0,5 °C в течение 22–26 часов.

* — соответствующий номер WDCM.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для работы с пробами воды.

• Ограничения: рекомендуется только для количественного определения аэробных спорообразующих микроорганизмов. Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Требования к образцам: сбор и обработка проб воды должны осуществляться согласно действующим руководствам и местным стандартам.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Безопасность: использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в инсинераторе перед утилизацией.