HiMedia M2046I-500G Основа агара с триптоном, дрожжевым экстрактом и сульфитом натрия

Основа агара с триптоном, дрожжевым экстрактом и сульфитом натрия HiMedia M2046I-500G для количественного определения Clostridium perfringens в пробах воды. Среда разработана в соответствии со спецификациями стандарта ISO 14189:2013; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения C. perfringens с использованием метода мембранной фильтрации. Триптон, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые соединения, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, серу, витамины группы B и микроэлементы, необходимые для роста клостридий. Метабисульфит натрия и цитрат аммония железа(III) служат индикаторами восстановления сульфита, что проявляется в виде образования чёрных колоний. Добавление D-циклосерина (добавка FD014) обеспечивает селективность, подавляя рост сопутствующей микрофлоры.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендируйте 21,0 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
2. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
3. Добавление селективной добавки: охладите среду до 45–50 °C. В асептических условиях добавьте содержимое одной ампулы селективной добавки T.S.C. (FD014), тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
4. Посев: пробу воды профильтруйте через мембранный фильтр с порами 0,45 мкм. Поместите мембрану на поверхность агара.
5. Инкубация: инкубируйте в анаэробных условиях при температуре 43–45 °C в течение 18–24 часов.
6. Интерпретация: сульфит реагирует с солью железа, образуя сульфид, что приводит к появлению чёрных, серо-желтых или коричневых колоний.

Подтверждающий тест

Для окончательной идентификации рекомендуется провести тест на кислую фосфатазу:

• Нанесите мазок роста 24-часовой культуры C. perfringens (выращенной на кровяном агаре, основе Columbia или агаре Tryptone Soya в анаэробных условиях при 34–38 °C) на стерильную фильтровальную бумагу.
• Добавьте 2–3 капли реагента на кислую фосфатазу (R096).
• Положительная реакция характеризуется появлением интенсивного пурпурного окрашивания в течение 3–4 минут.

Технические характеристики

Состав основы (г/л)

Добавка после автоклавирования (г/л)

Состав добавки T.S.C. Supplement - FD014

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: регулярный
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: светло-желтый или коричнево-желтый однородный свободнотекучий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,40–7,80

Контроль качества и культуральные характеристики

Инкубация проводилась в анаэробной атмосфере при 44 $\pm$ 1 °C в течение 21 $\pm$ 3 ч с добавлением стерильной селективной добавки T.S.C. (FD014).

^ Восстановление для продуктивности $\ge$ 70 % по сравнению с референсным агаром Soyabean Casein Digest (Tryptone Soya Agar).

Область применения

Среда рекомендуется для количественного анализа проб воды. Для сбора и обработки проб следует руководствоваться местными стандартами и рекомендациями ISO 14189.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения основы: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию.