HiMedia M2032-500G Модифицированная основа среды Лёвенштейна-Йенсена

Микробиологическая питательная среда-основа HiMedia M2032-500G Модифицированная основа среды Лёвенштейна-Йенсена представляет собой порошковую среду без компонентов животного происхождения для выделения и культивирования микобактерий. Среда применяется при исследовании клинических образцов, включая мокроту, а при культивировании глицерофобных штаммов добавление глицерина не допускается.

Назначение

Среда предназначена для выделения и культивирования видов Mycobacterium. Тип исследуемого образца: клинические образцы, мокрота.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,34 г порошка в 600 мл дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. Для культивирования других глицерофобных организмов добавление глицерина нежелательно.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 psi (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Одновременно асептически приготовьте 1000 мл эмульсии цельного яйца.
5. Асептически добавьте 1000 мл эмульсии яйца к стерильной основе среды и перемешайте.
6. Асептически добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки LCN (FD338).
7. Осторожно перемешайте до получения однородной смеси.
8. Разлейте по 8 мл в стерильные пробирки с завинчивающимися крышками.
9. Расположите пробирки под наклоном.
10. Коагулируйте и уплотняйте среду в водяной бане для уплотнения среды либо в автоклаве при 85 °C в течение 45 мин.

Принцип действия и интерпретация

Твёрдые среды для выделения и культивирования Mycobacteria бывают яичными или агаризованными. Яичные среды содержат цельные яйца или яичный желток, картофельную муку, соли и глицерин; отверждение таких сред выполняют уплотнением.

Среда Лёвенштейна—Йенсена относится к наиболее распространённым яичным средам. Первоначальная формула Лёвенштейна содержала красный конго и малахитовый зелёный. Йенсен модифицировал среду Лёвенштейна: изменил содержание цитрата и фосфата, исключил красный конго и увеличил концентрацию малахитового зелёного.

Среда поддерживает рост широкого спектра микобактерий и может применяться для тестирования на ниацин.

Линкомицин, циклогексимид и налидиксовая кислота вместе с малахитовым зелёным подавляют рост большинства загрязняющих микроорганизмов, сохраняющихся после деконтаминации образца, и одновременно поддерживают наиболее ранний возможный рост микобактерий. При культивировании бычьих или других глицерофобных штаммов глицерин в среду не добавляют.

Малахитовый зелёный выполняет функции ингибитора и индикатора pH:

• образование синей зоны указывает на снижение pH под действием грамположительных загрязняющих микроорганизмов;
• образование жёлтых зон указывает на разрушение красителя грамотрицательными бациллами;
• протеолитические загрязняющие микроорганизмы вызывают локальное или полное разрушение среды.

Добавка LCN содержит циклогексимид, линкомицин и налидиксовую кислоту:

• циклогексимид подавляет рост сапрофитных организмов;
• линкомицин ингибирует грамположительные организмы;
• налидиксовая кислота ингибирует грамотрицательные организмы в клинических образцах.

Для стандартных процедур деконтаминации и выделения следует использовать соответствующие методические источники.

Требования к образцам и обращению

При работе с клиническими образцами соблюдайте установленные методики обращения с образцами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для применения при диагностике in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.
2. Отдельные организмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать на среде неодинаковые характеристики роста.
3. Каждая серия среды проверена на организмы, указанные в сертификате анализа (COA). Пользователю рекомендуется валидировать среду для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, с учётом индивидуальных требований применения.

Оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от зеленовато-синего до павлинье-синего цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Смесь стерильной базовой среды и эмульсии цельного яйца после уплотнения коагулирует с образованием гладких непрозрачных скосов бледного голубовато-зелёного цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в присутствии 5–10 % углекислого газа, на основе с добавленной эмульсией яйца, после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Хранение и срок годности

Х