HiMedia M2032-500G Модифицированная основа среды Лёвенштейна-Йенсена

Модифицированная основа среды Лёвенштейна-Йенсена HiMedia M2032-500G предназначена для изоляции и культивирования видов Mycobacterium. Среда используется для работы с клиническими образцами (мокрота) и обеспечивает подавление большинства контаминантов за счёт селективных добавок.

Принцип измерения и интерпретация

Среды для изоляции и культивирования микобактерий (Mycobacteria) бывают на основе агара или яиц. Среды на основе яиц содержат цельные яйца или яичный желток, картофельную муку, соли и глицерин; затвердевание происходит путём инсписсации (сгущения при нагревании).

Модифицированная среда Лёвенштейна-Йенсена (L.J.) была разработана путём изменения содержания цитрата и фосфатов, исключения красителя конго-ред и увеличения концентрации малахитового зеленого. Данный состав поддерживает рост широкого спектра микобактерий и может применяться для проведения ниацинового теста.

Малахитовый зеленый выступает в роли ингибитора и pH-индикатора:

• Образование синей зоны указывает на снижение pH из-за роста грамположительных контаминантов.
• Жёлтые зоны свидетельствуют о разрушении красителя грамотрицательными бациллами.
• Протеолитические контаминанты вызывают локальный или полный распад среды.

При использовании добавки LCN Supplement (содержащей циклогексимид, линкомицин и налидиксовую кислоту) подавляется рост сапрофитных организмов, грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов в клинических образцах.

Состав

Состав на 600 мл среды:

Методика приготовления и использования

Приготовление основы

1. Растворите 37,34 г порошка в 600 мл дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. При необходимости прогрейте для полного растворения.
2. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
3. Параллельно приготовьте 1000 мл цельной яичной эмульсии, собранной асептически.

Сборка и инсписсация

1. Асептически добавьте 1000 мл яичной эмульсии в стерильную основу среды и перемешайте.
2. Асептически добавьте содержимое одной ампулы добавки LCN Supplement (FD338) после её регидратации. Аккуратно перемешайте до однородности.
3. Распределите по 8 мл смеси в стерильные пробирки с завинчивающимися крышками.
4. Расположите пробирки под наклоном.
5. Проведите коагуляцию и инсписсацию среды в водяной бане-инсписсаторе или автоклаве при температуре 85 °C в течение 45 минут.

Важное ограничение: Не добавляйте глицерин в среду, если планируется культивирование бычьих или других глицерофобных штаммов.

Технические характеристики

• Назначение: Основа питательной среды
• Вес: 500 г
• Физическая форма: Порошок
• Цвет порошка: от зеленовато-синего до синего (цвет павлина), гомогенный, свободно текущий
• Цвет и вид готовой среды: бледно-сине-зелёные, опаковые гладкие скосы
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение: Без компонентов животного происхождения (растительная основа)

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при инкубации в присутствии 5–10 % $\text{CO}_2$ с добавлением яичной эмульсии при температуре 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте бутылку для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Работа с клиническими образцами должна проводиться в соответствии с установленными руководствами по безопасности и микробиологическими практиками.
• Загрязненные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.