HiMedia M2012-500G Основа бульона Борде-Жангу

Основа бульона Борде-Жангу HiMedia M2012-500G для селективного обогащения культур Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis. Применяется для выделения возбудителей коклюша из клинического материала; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Основа бульона Борде-Жангу разработана для культивирования видов Bordetella. Настой картофеля и пептон служат источниками углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и основных питательных веществ, а глицерин и обогащение кровью обеспечивают дополнительные нутриенты. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Среда обладает высокой питательной ценностью, что поддерживает обильный рост видов Bordetella. Она может использоваться для массового культивирования B. pertussis при производстве вакцин и для поддержания стоковых культур. Для повышения селективности среды могут добавляться антибиотики, такие как пенициллин, метициллин или цефалексин (последний является наиболее эффективным, так как подавляет нежелательный рост микрофлоры носоглотки и значительно увеличивает частоту выделения видов Bordetella).

Область применения

Среда предназначена для выделения Bordetella pertussis из фарингеальных экстрактов, носоглоточных секретов и преназальных мазков.

• Тип образца: клинические образцы, мокрота.
• Сценарии использования: диагностика коклюша, производство вакцин, хранение рабочих культур.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 15–20 % стерильной свежей дефибринированной крови (овечьей, кроличьей, человеческой или лошадиной).
6. Для обеспечения селективности асептически добавьте содержимое двух флаконов селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004).
7. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура анализа и интерпретация

1. Инкубацию следует проводить в увлажненной камере (влажность 60 %) при температуре 37 °C в течение периода до 7 суток.
2. Среда не должна быть пересушена перед использованием.
3. Через 40 часов колонии B. pertussis выглядят гладкими, выпуклыми, блестящими с зоной гемолиза.
4. Учитывая, что некоторые штаммы Bordetella не являются гемолитическими, для подтверждения результатов необходимо провести серологическую диагностику и биохимические тесты.
5. При выделении B. pertussis из образцов используйте стандартные процедуры. Инкубируйте чашки в увлажненной камере при 35–37 °C в течение 7 дней, ежедневно исследуя их (в том числе с помощью диссекционного микроскопа с косым освещением).

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,7 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,50–6,90

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды:
  • Базовая среда: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
  • После добавления глицерина и 15 % (об/об) стерильной дефибринированной крови: в пробирках образуется непрозрачный раствор вишнево-красного цвета.
• Реакция: pH 2,0 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 6,7 $\pm$ 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении глицерина, 15 % (об/об) стерильной дефибринированной крови и селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004) после инкубации при 35–37 °C в течение 3–4 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения и предостережения

• Некоторые виды Haemophilus могут расти на средах для изоляции Bordetella и давать перекрестную реакцию с антисыворотками к B. pertussis.
• Колонии B. pertussis могут быть не видны без микроскопа в течение 2–4 дней.
• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и правила микробиологических лабораторий.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты должны быть подвергнуты автоклавированию и/или сжиганию в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.