HiMedia M2009-500G Основа дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes

Основа дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes HiMedia M2009-500G предназначена для селективного выделения, подсчета и идентификации видов Listeria на основе активности PCPLC. Среда используется для анализа пищевых продуктов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда HiCrome® L.mono Differential Agar Base разработана для селективного и дифференциального выделения видов Listeria на основе использования хромогенного субстрата и лецитиназной активности [фосфатидилхолин-фосфолипаза C (PCPLC)].

Основные компоненты и их функции:

• Пептон, триптон, дрожжевой экстракт и пируват натрия: обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и необходимые питательные вещества для роста.
• Мальтоза: ферментируемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Фосфаты: выполняют роль буфера.
• Хлорид лития и селективная добавка (FD333): подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
• Хромогенный субстрат: гидролизуется видами Listeria, что приводит к образованию колоний зеленого цвета.
• Раствор лецитина (FD332): позволяет обнаружить активность PCPLC.

Дифференциация видов основана на активности PCPLC: L. monocytogenes и L. ivanovii проявляют эту активность, что визуализируется как опалесцирующий (матовый) ореол вокруг колонии.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 33,60 г порошка в 480 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона стерильного раствора лецитина (FD332) и стерильное регидратированное содержимое селективной добавки PANC (FD333).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические параметры

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,4% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Дополнительные спецификации

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании стерильной селективной добавки PANC (FD333) и раствора лецитина (FD332) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов.

Ограничения:

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Возможны незначительные отклонения в цвете колоний в зависимости от степени утилизации субстрата микроорганизмом.
• Для окончательного подтверждения результатов требуется проведение тестов на чувствительность.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами необходимо использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица, соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Утилизация: загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.