HiMedia M1994-500G Основа селективного LM агара (селективный агар для L. monocytogenes)

Порошковая питательная среда HiMedia M1994-500G Основа селективного LM агара (селективный агар для L. monocytogenes) предназначена для приготовления селективной среды с конечным pH 7,4 ± 0,1. Основа применяется для предположительного количественного определения Listeria spp. в пищевых и экологических образцах методом мембранной фильтрации, при этом для полной идентификации требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение и область применения

Основа селективного LM агара рекомендована для прямого предположительного количественного определения видов Listeria, особенно Listeria monocytogenes, в мясных и птицеводческих продуктах, молочной продукции и образцах окружающей среды методом мембранной фильтрации.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые образцы.
• Образцы окружающей среды.

Состав

Расход компонентов для приготовления 1 л среды:

Экстракт HL эквивалентен печёночному экстракту.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,1
• Назначение: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Упаковка: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 60,42 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте в автоклаве при давлении 15 psi (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка FD045.
6. Добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки LM Selective Supplement FD330.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Род Listeria включает Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Listeria seeligeri, Listeria welshimerii, Listeria innocua, Listeria grayi, Listeria murrayi и Listeria denitrificans. L. monocytogenes и L. ivanovii связаны с заболеваниями человека; патогенность L. ivanovii считается неопределённой. L. monocytogenes встречается в различных средах обитания, включая нормальную микрофлору здоровых жвачных животных, желудочно-кишечный тракт людей без симптомов заболевания и объекты окружающей среды.

Триптон и экстракт HL обеспечивают среду азотистыми соединениями, аминокислотами и длинноцепочечными пептидами. Дрожжевой экстракт поставляет витамины, особенно витамины группы B, необходимые микроорганизмам. Декстроза (глюкоза) служит источником углерода и энергии. Пируват натрия является источником энергии и способствует восстановлению микроорганизмов. Карбонат натрия выполняет буферную функцию. Хлорид лития и акрифлавин являются селективными агентами.

Полимиксина B сульфат, налидиксовая кислота и натриевая соль моксифлоксацина подавляют сопутствующую микрофлору. Трифенилтетразолия хлорид восстанавливается видами Listeria, в результате чего образуются колонии от розового до тёмно-розово-оранжевого цвета.

Методика проведения анализа

1. Приготовьте гомогенат исследуемого образца.
2. Отфильтруйте 1 мл гомогената через мембранный фильтр.
3. Поместите мембранный фильтр на чашку с LM Selective Agar Base.
4. Инкубируйте чашки при 35–37 °C в течение 18–48 ч.
5. После инкубации оцените наличие колоний от розового до розово-красного цвета как предположительно относящихся к видам Listeria.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов окружающей среды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 6,04%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,1
• Диапазон pH: 7,30–7,50

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют на мембранном фильтре с добавленными эмульсией яичного желтка FD045 и селективной добавкой LM Selective Supplement FD330 после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Staphylococcus aureus subsp. aureus демонстрирует слабый рост на этой среде.
2. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, а также при использовании продукта в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения обезвоженной основы: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия