HiMedia M1994-500G Основа селективного LM агара (селективный агар для L. monocytogenes)

Основа селективного LM агара HiMedia M1994-500G (селективный агар для L. monocytogenes) производства HiMedia весом 500 г. Рекомендована для предварительного количественного учёта видов Listeria с использованием метода мембранной фильтрации.

Принцип измерения

Среда предназначена для прямого предварительного подсчёта бактерий рода Listeria, в частности Listeria monocytogenes, в образцах мяса, птицы, молочных продуктов и проб окружающей среды.

Техническая роль компонентов:

• Триптон и экстракт печени (HL extract) обеспечивают азотистые соединения, аминокислоты и длинноцепочечные пептиды.
• Экстракт дрожжей служит источником витаминов (особенно витамина B).
• Декстроза (глюкоза) выступает в качестве углеводного источника и источника энергии.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Пируват натрия служит дополнительным источником энергии и способствует восстановлению микроорганизмов.
• Карбонат натрия выполняет функцию буфера.
• Хлорид лития и акрифлавин являются селективными агентами.
• Сульфат полимиксина B, налидиксовая кислота и моксалактум натрия подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
• Хлорид трифенилтетразолия восстанавливается видами Listeria, в результате чего колонии приобретают розовый или тёмно-розово-оранжевый цвет.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте гомогенат исследуемого образца.
2. Профильтруйте 1 мл гомогената через мембранный фильтр.
3. Поместите мембрану на поверхность чашек с подготовленным селективным LM-агаром.
4. Инкубируйте чашки при температуре 35–37 °C в течение 18–48 часов.
5. После инкубации идентифицируйте розовые или розово-красные колонии как предварительные виды Listeria.

Приготовление среды

1. Растворите 60,42 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и содержимое 1 флакона селективной добавки LM (FD330).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,1
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель
  • После добавления эмульсии желтка: жёлтый непрозрачный гель
• Диапазон pH: 7,30–7,50

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются на мембранном фильтре с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045) и селективной добавки LM (FD330) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа пищевых продуктов (мясо, птица, молочные изделия) и проб окружающей среды.

Ограничения:

• Staphylococcus aureus subsp. aureus демонстрирует слабый рост на данной среде.
• Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения (сухая и приготовленная среда): 2–8 °C.
• Требования: хранить в плотно закрытом контейнере в сухом вентилируемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскочности продукта неправильное хранение может привести к образованию комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Загрязнённые материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.