HiCrome Chromogenic Coliform Agar (CCA) HiMedia M1991I-500G (500 г)

HiMedia·Арт.: 0038959·Арт. произв.: M1991I-500G

HiCrome Chromogenic Coliform Agar (CCA) HiMedia M1991I-500G (500 г)

Name: HiCrome Chromogenic Coliform Agar (CCA) HiMedia M1991I-500G (500 г)
Brand: HiMedia
SKU: 0038959
Price: 96060 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ96 060 руб.

Хромогенный агар для определения колиформ HiCrome Chromogenic Coliform Agar (CCA) HiMedia M1991I-500G (500 г). Рекомендуется для обнаружения Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды в соответствии со спецификациями ISO 9308-1:2014.

Описание

Принцип измерения

Среда является селективной и содержит три хромогенных субстрата для дифференциации микроорганизмов:

Фермент $\beta$ -D-галактозидаза, вырабатываемый колиформами, расщепляет 6-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-галактопиранозид, в результате чего образуются колонии от розового до красного цвета.
Фермент $\beta$ -D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет 5-бром-4-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-глюкуроновую кислоту.
Колонии E. coli приобретают тёмно-синий или фиолетовый цвет благодаря расщеплению обоих хромогенов.
Третий хромоген, IPTG (изопропил- $\beta$ -D-тиогалактопиранозид), усиливает интенсивность цветовой реакции.
Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает надёжность идентификации.

Тритон-7 подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам. Тритон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотистые вещества, ферментируемые углеводы и другие питательные компоненты. Фосфаты поддерживают pH среды. Состав среды способствует восстановлению и быстрому росту даже сублетально поврежденных колиформ.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и фильтрация

Профильтруйте 100 мл пробы через мембранный фильтр.
Минимальный объём фильтрации (или разведения) должен составлять 10 мл для обеспечения равномерного распределения бактерий по мембране.

Инкубация и дифференциация

Поместите мембранный фильтр на поверхность агара HiCrome CCA, следя за тем, чтобы под мембраной не осталось пузырьков воздуха.
Переверните чашку Петри и инкубируйте при температуре 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 часов.
Оцените изменение цвета колоний на мембранном фильтре.

Подтверждение

Для подтверждения E. coli на тёмно-синие или фиолетовые колонии нанесите каплю реагента Ковача. Образование вишнёво-красного окрашивания свидетельствует о положительной реакции. Также могут быть проведены дополнительные биохимические и серологические тесты.

Приготовление среды

Суспендируйте 30,92 г сухого остатка (эквивалентный вес на 1 литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
ВНИМАНИЕ: Не автоклавировать и не перегревать среду.
Охладите до 45–50 °C.
Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (ISO 9308-1:2014)

Состав на 1 литр среды:

Компонент	г/л
Триптон (ферментный гидролизат казеина)	1,000
Экстракт дрожжей	2,000
Хлорид натрия	5,000
Дигидрофосфат натрия, 2H₂O	2,200
Гидрофосфат натрия	2,700
Пируват натрия	1,000
Сорбитол	1,000
Триптофан	1,000
Tergitol-7	0,150
6-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-галактопиранозид	0,200
5-бром-4-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-глюкуроновая кислота (циклогексиламмониевая соль моногидрат)	0,100
IPTG (изопропил- $\beta$ -D-тиогалактопиранозид)	0,100
Агар	15,000

Конечный pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2

Дополнительные параметры

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	HiCrome™
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый опалесцирующий гель.
pH (3,09 % водный раствор при 25 °C): 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Результаты получены после инкубации при 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 часов. Скорость восстановления считается 100 % при росте на контрольной среде — соево-казеиновом дигест-агаре (Tryptone Soya Agar).

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии
Продуктивность
Escherichia coli ATCC 25922 (00013)	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	тёмно-синий / фиолетовый
Escherichia coli ATCC 8739 (00012)	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	тёмно-синий / фиолетовый
Citrobacter freundii ATCC 43864 (00006)	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	розовый / красный
Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175)	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	розовый / красный
Селективность
Enterococcus faecalis ATCC 19433 (00009)	$\ge 10^4$	подавлен	-	-
Специфичность
Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 (00024)	$10^3\text{--}10^4$	рост	-	бесцветные

Условия эксплуатации и хранения

Хранение сухого остатка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать крышку во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения применения

Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
Рекомендуется валидировать среду для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
Для окончательного подтверждения вида микроорганизма необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Утилизация

Утилизация использованных или непригодных препаратов должна осуществляться путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.