HiMedia M1991AI-500G HiCrome хромогенный колиформный агар с 1% агара

HiMedia·Арт.: 0049589·Арт. произв.: M1991AI-500G

HiMedia M1991AI-500G HiCrome хромогенный колиформный агар с 1% агара

Name: HiMedia M1991AI-500G HiCrome хромогенный колиформный агар с 1% агара
Brand: HiMedia
SKU: 0049589
Price: 74006 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ74 006 руб.

Хромогенный колиформный агар HiMedia M1991AI-500G HiCrome с 1 % агара предназначен для обнаружения Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 9308-1:2014.

Описание

Принцип измерения

HiCrome® Chromogenic Agar представляет собой селективную среду, содержащую три хромогенных субстрата:

Фермент $\beta$ -D-галактозидаза, вырабатываемый колиформами, расщепляет 6-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-галактопиранозид, в результате чего образуются колонии от розового до красного цвета.
Фермент $\beta$ -D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет 5-бромо-4-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-глюкуроновую кислоту.
Колонии E. coli приобретают темно-синий или фиолетовый цвет благодаря расщеплению обоих хромогенов.

Присутствие третьего хромогена IPTG (изопропил- $\beta$ -D-тиогалактопиранозид) усиливает цветную реакцию. Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает надежность обнаружения.

Триптон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотсодержащие вещества, ферментируемые углеводы и другие необходимые питательные вещества. Фосфаты служат буфером. Состав среды способствует восстановлению и быстрому росту даже сублетально поврежденных колиформ. Тергитол-7 подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и фильтрация

Для анализа используются пробы воды. Фильтруют 100 мл пробы через мембранный фильтр. Минимальный объем для фильтрации (или разведения) должен составлять 10 мл для обеспечения равномерного распределения бактерий по мембране.

Инкубация и дифференциация

Поместите мембранный фильтр на поверхность агара HiCrome® Chromogenic Coliform (CCA), убедившись, что под фильтром не осталось пузырьков воздуха.
Переверните чашку Петри и инкубируйте при температуре $36 \pm 2$ °C в течение $21 \pm 3$ часов.
Оцените изменение цвета колоний на мембранном фильтре.

Подтверждение

Для подтверждения наличия E. coli на темно-синюю или фиолетовую колонию наносят каплю реактива Ковакса. Образование вишнево-красного окрашивания указывает на положительную реакцию. Также могут быть проведены дополнительные биохимические и серологические тесты.

Приготовление среды

Суспендируйте 25,92 г сухой среды (эквивалентный вес на 1 литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
ВНИМАНИЕ: Не автоклавировать и не перегревать среду.
Охладите до 45–50 °C.
Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Компонент	г/л
Триптон	1,000
Экстракт дрожжей	2,000
Хлорид натрия	5,000
Дигидрофосфат натрия, 2H₂O	2,200
Гидрофосфат натрия	2,700
Пируват натрия	1,000
Сорбитол	1,000
Триптофан	1,000
Тергитол-7	0,150
6-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-галактопиранозид	0,200
5-бромо-4-хлоро-3-индоксил- $\beta$ -D-глюкуроновая кислота (X-beta-G-глюкуронид, соль CHX)	0,100
IPTG (изопропил- $\beta$ -D-тиогалактопиранозид)	0,100
Агар	10,000

Конечный pH (при 25 °C): $6,8 \pm 0,2$
Вес нетто: 500 г
Тип продукта: HiCrome™
Физическая форма: порошок
Материал упаковки: ПНД (HDPE)
Происхождение компонентов: животное

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при $36 \pm 2$ °C в течение $21 \pm 3$ часов. Восстановление оценивается относительно среды TSA.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колоний
Продуктивность
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	обильный	$\ge 70 \%$	темно-синий / фиолетовый
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	обильный	$\ge 70 \%$	темно-синий / фиолетовый
Citrobacter freundii ATCC 43864	50–100	обильный	$\ge 70 \%$	розовый / красный
Klebsiella aerogenes ATCC 13048	50–100	обильный	$\ge 70 \%$	розовый / красный
Селективность
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	—	—
Специфичность
Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145	50–100	рост	—	бесцветные

Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаром.
Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый опалесцирующий гель.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение сухой среды: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать бутылку во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предупреждения

Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
Рекомендуется валидировать среду для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
Работа со средой должна осуществляться только обученным персоналом с использованием средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) в соответствии с правилами микробиологической безопасности.