HiMedia M1991AI-100G HiCrome хромогенный колиформный агар с 1% агара

HiMedia·Арт.: 0049588·Арт. произв.: M1991AI-100G

HiMedia M1991AI-100G HiCrome хромогенный колиформный агар с 1% агара

Name: HiMedia M1991AI-100G HiCrome хромогенный колиформный агар с 1% агара
Brand: HiMedia
SKU: 0049588
Price: 20557 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ20 557 руб.

Хромогенный колиформный агар HiMedia M1991AI-100G HiCrome с 1 % агара для обнаружения Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 9308-1:2014.

Описание

Принцип измерения

HiCrome® Chromogenic Agar является селективной средой, рекомендованной ISO для подсчета Escherichia coli и колиформных бактерий. В составе среды используются три хромогенных субстрата:

Фермент $\beta$ -D-галактозидаза, вырабатываемый колиформами, расщепляет 6-хлоро-3-индокси- $\beta$ -D-галактопиранозид, что приводит к образованию колоний розового или красного цвета.
Фермент $\beta$ -D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет 5-бром-4-хлоро-3-индокси- $\beta$ -D-глюкуроновую кислоту.
Колонии E. coli приобретают темно-синий или фиолетовый цвет за счет одновременного расщепления обоих хромогенов.

Присутствие третьего хромогена — IPTG (изопропил- $\beta$ -D-тиогалактопиранозида) — усиливает цветную реакцию. Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает надежность идентификации.

Триптон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотистые вещества, ферментируемые углеводы и другие необходимые питательные вещества. Фосфаты выполняют роль буфера. Формуляция среды способствует восстановлению и быстрому росту даже сублетально поврежденных колиформ. Tergitol-7 подавляет рост грамположительных, а также некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и фильтрация

Для анализа используются пробы воды.

Профильтруйте 100 мл пробы через мембранный фильтр.
Минимальный объем для фильтрации должен составлять 10 мл (или разведения) для обеспечения равномерного распределения бактерий по мембране.

Инкубация и дифференциация

Поместите мембранный фильтр на поверхность агара HiCrome® Chromogenic Coliform (CCA), убедившись, что под мембраной не осталось пузырьков воздуха.
Переверните чашку Петри и инкубируйте при температуре 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 часов.
Оцените изменение цвета колоний на мембранном фильтре.

Подтверждение

Для подтверждения E. coli на темно-синие или фиолетовые колонии нанесите каплю реактива Ковакса. Образование вишнево-красного окрашивания свидетельствует о положительной реакции. Также могут быть проведены биохимические и серологические тесты.

Приготовление среды

Суспендируйте 25,92 г сухого остатка (эквивалентный вес среды на 1 литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
ВНИМАНИЕ: НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ.
Охладите до 45–50 °C.
Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Компонент	г/л
Триптон	1,000
Экстракт дрожжей	2,000
Хлорид натрия	5,000
Дигидрофосфат натрия, 2H₂O	2,200
Гидрофосфат натрия двузамещенный	2,700
Пируват натрия	1,000
Сорбитол	1,000
Триптофан	1,000
Tergitol-7	0,150
6-хлоро-3-индокси- $\beta$ -D-галактопиранозид	0,200
5-бром-4-хлоро-3-индокси- $\beta$ -D-глюкуроновая кислота (X-beta-G-глюкуронид, соль CHX)	0,100
IPTG (изопропил- $\beta$ -D-тиогалактопиранозид)	0,100
Агар	10,000

Конечный pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2

Общие параметры

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	HiCrome™
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Вес: 100 г

Контроль качества и эффективность

Внешний вид и свойства

Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаром.
Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый опалесцирующий гель в чашках Петри.
pH (2,59 % водного раствора при 25 °C): 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 36 ± 2 °C в течение 21 ± 3 часов. Восстановление оценивается относительно среды TSA.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии
Продуктивность
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	темно-синий / фиолетовый
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	темно-синий / фиолетовый
Citrobacter freundii ATCC 43864	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	розовый / красный
Klebsiella aerogenes ATCC 13048	50–100	обильный	$\ge$ 70 %	розовый / красный
Селективность
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	-	-
Специфичность
Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145	50–100	рост	-	бесцветные

Условия эксплуатации и хранения

Хранение сухого остатка: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения применения

Индивидуальные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести собственную валидацию среды.