HiMedia M1989-500G Модифицированная основа кровяного агара

Модифицированная основа кровяного агара HiMedia M1989-500G — высокопитательная сухая среда для приготовления кровяного агара путём добавления стерильной крови. Применяется для изоляции и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип работы и интерпретация

Модифицированная основа кровяного агара (Blood Agar Base, Modified) используется как базальная среда для приготовления кровяного агара. Также может применяться как среда общего назначения без добавления крови.

Триптон и пептон HM обеспечивают организм углеродом, азотом, аминокислотами и витаминами. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Фосфаты выполняют роль буфера, а бисульфит натрия выступает в качестве восстановителя. Добавление крови обогащает среду факторами роста, необходимыми для требовательных микроорганизмов, и позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Характер гемолиза зависит от используемой крови животного:

• Кровь овец обеспечивает наилучшие результаты для стрептококков группы A, однако не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus из-за дефицита пиридин-нуклеотидов.
• Кровь лошадей позволяет выращивать H. haemolyticus, колонии которого вызывают гемолиз и могут имитировать Streptococcus pyogenes.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 33,64 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Типы образцов: клинический материал (фекалии, гной, образцы из ран).
• Сбор и обработка проб должны проводиться в соответствии с установленными руководствами по работе с клиническими образцами.
• После использования загрязненные материалы подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободный порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,35 % агаром.
• Цвет и прозрачность (базальная среда): светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Цвет и прозрачность (с 5 % кровью): непрозрачный гель вишнево-красного цвета.
• pH (3,36 % водный раствор при 25 °C): 6,80–7,20 (номинал 7,0 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании 5 % (мас/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов.

Ограничения применения

1. Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавление крови овец. Данная среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление крови лошадей или кроликов поддерживает рост H. haemolyticus, однако колонии могут напоминать бета-гемолитические стрептококки, что требует подтверждения.
3. Характер гемолиза варьируется в зависимости от источника крови.
4. Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• Использовать средства индивидуальной защиты: защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.