Питательная среда HiMedia M1989-500G Модифицированная основа кровяного агара производства HiMedia в виде порошка для приготовления кровяного агара. Основа предназначена для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов после добавления 5 % стерильной дефибринированной крови, масса упаковки — 500 г.

Назначение

Модифицированная основа кровяного агара предназначена для приготовления кровяного агара с добавлением крови, используемого для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов. Среда также может применяться как универсальная питательная среда без добавления крови.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Пептон HM эквивалентен мясному пептону.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 33,64 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Триптон и пептон HM обеспечивают среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Фосфаты выполняют буферную функцию. Бисульфит натрия используется как восстановитель.

Добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуализировать гемолитические реакции. Характер гемолиза зависит от вида использованной животной крови.

Овечья кровь обеспечивает лучшие результаты при культивировании стрептококков группы A. При этом овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов. При использовании лошадиной крови колонии H. haemolyticus образуют гемолиз и имитируют Streptococcus pyogenes.

Типы образцов

Клинический материал:

• фекалии;
• гной;
• материал из раны.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с пробами в соответствии с установленными лабораторными правилами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными лабораторными правилами.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако образующиеся колонии могут напоминать β-гемолитические стрептококки и требуют подтверждения.
3. Характер гемолиза зависит от источника использованной крови.
4. Для подтверждения необходимо выполнять биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 3,36%-ного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5 % мас./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на маркировке. После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая контейнер для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.