Основа бульона Миддлбрука 7Н9 HiMedia M198-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Основа бульона Миддлбрука 7Н9 HiMedia M198-500G (уп/500 гр) — порошковая основа для приготовления жидкой среды с конечным pH 6,6 ± 0,2. Основа бульона Миддлбрука 7Н9 применяется для культивирования Mycobacterium tuberculosis и определения чувствительности микобактерий к антимикробным препаратам; при инкубации необходимы аэробные условия и повышенное содержание CO₂.

Назначение

Основа бульона Миддлбрука 7Н9 предназначена для культивирования и определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis. С ростовой добавкой Middlebrook ADC (FD019), глицерином или полисорбатом 80 среда также применяется:

• для культивирования микобактерий;
• для определения содержания изониазида (INH) в сыворотке пациентов;
• приготовления инокулята для анализов на чувствительность к антимикробным препаратам;
• в качестве базовой среды для биохимических тестов;
• для пересевов стандартных штаммов;
• для первичного выделения микобактерий из образцов после соответствующей обработки пробы.

Тип питательной среды: диагностический
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среды для культивирования микобактерий подразделяются на яичные, например среда Лёвэнштейна—Йенсена, и агаровые, к которым относятся среды Миддлбрука. В состав различных формуляций Дюбоса и Миддлбрука входят олеиновая кислота и альбумин, защищающие микобактерии от токсичных веществ и способствующие росту туберкулёзных бацилл.

Основа бульона Миддлбрука 7Н9 содержит неорганические соли, необходимые для роста микобактерий. Цитратная кислота, образующаяся из цитрата натрия, способствует удержанию неорганических катионов в растворе. Глицерин служит источником углерода и энергии. Длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий.

Ростовая добавка Middlebrook ADC (FD019) содержит бычий альбумин, декстрозу и каталазу:

• альбумин связывает свободные жирные кислоты, некоторые из которых токсичны для микобактерий, и предотвращает их токсическое действие;
• декстроза служит источником энергии;
• каталаза нейтрализует токсичные пероксиды.

Микобактерии растут в жидких бульонных средах быстрее, поэтому основу бульона Миддлбрука 7Н9 можно использовать для первичного выделения микобактерий из всех типов образцов. После необходимой обработки образца среду инокулируют исследуемым материалом.

Микобактерии являются строгими аэробами, поэтому во время инкубации необходимо обеспечить аэробные условия и повышенное содержание CO₂.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 2,35 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 мл глицерина или 0,5 г полисорбата 80.
3. При необходимости нагрейте смесь до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа).
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона ростовой добавки Middlebrook ADC (FD019).
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Требования к образцам

Тип образца: клинические образцы, мокрота.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам. Необходимо обеспечить правильный сбор образца: для исследования требуется мокрота, а не слюна.

Образцы следует обрабатывать с соблюдением мер, предотвращающих загрязнение. При деконтаминации образцов необходимо соблюдать осторожность. Материалы, загрязнённые после использования, перед утилизацией стерилизуйте автоклавированием.

Ограничения применения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Во время инкубации необходимо обеспечить повышенное содержание CO₂ и аэробные условия, поскольку микобактерии являются строгими аэробами.
• Образцы следует тщательно собирать, обрабатывать и хранить во избежание контаминации.

Технические характеристики

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2
Диапазон pH: 6,40–6,80

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободно текучий порошок кремового или бежевого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 0,47 % масса/объём, содержащего глицерин или полисорбат 80, при 25 °C; pH 6,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики определяют после добавления ростовой добавки Middlebrook ADC (FD019) и глицерина или полисорбата 80, а также после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте действующие лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с применяемыми лабораторными методиками.

Комплект