Питательная агаровая среда HiMedia M1978-500G Идентификационный агар для E. coli O157 с MUG предназначена для выделения и идентификации Escherichia coli O157:H7 в пищевых образцах. Среда дифференцирует лактозоположительные и лактозоотрицательные микроорганизмы по цвету колоний, а β-глюкуронидазную активность выявляет по флуоресценции под длинноволновым УФ-излучением; автоклавирование приготовленной среды не допускается.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и идентификации Escherichia coli O157:H7 в пищевых образцах. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Состав

Состав на 1 л:

▲ Эквивалент казеинового пептона.

Эквивалент мясного пептона.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Казитоза и пептон HM обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами. Лактоза служит источником углерода и энергии. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, формируют жёлтые колонии. Лактозоотрицательные штаммы, включая Escherichia coli O157:H7, растут в виде розовых колоний.

4-метилумбеллиферил β-D-глюкуронид (MUG) превращается патогенами, образующими β-глюкуронидазу, в 4-метилумбеллиферон. 4-метилумбеллиферон флуоресцирует под воздействием ультрафиолетового излучения.

Все комменсальные штаммы Escherichia coli продуцируют β-глюкуронидазу. Escherichia coli O157:H7 не способна образовывать β-глюкуронидазу, поэтому при воздействии длинноволнового УФ-излучения флуоресценция не наблюдается.

Для усиления флуоресценции чашки можно подвергнуть воздействию паров аммиака.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 30,55 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Тщательно перемешайте среду.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образцов

• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим указаниям. Материалы, загрязнённые после работы, перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с биологическим материалом.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
2. Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.
3. Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост вследствие различий в питательных потребностях.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,4 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,05 % при 25 °C.
• pH раствора при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Тип продукта: стандартный.
• Физическая форма: порошок.
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 500 г.
• Происхождение компонентов: животное.
• Конечный pH: 7,4 ± 0,2 при 25 °C.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните контейнер в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный технический контекст

В отличие от неспецифических питательных агаровых сред, HiMedia M1978-500G сочетает дифференциацию по ферментации лактозы с выявлением β-глюкуронидазной активности по флуоресценции MUG под УФ-излучением.