HiMedia M1972-500G RPMI 1640 агар с MOPS и 2% глюкозы

Агаризованная питательная среда HiMedia M1972-500G RPMI 1640 агар с MOPS и 2% глюкозы производства HiMedia с конечным значением pH 7,0 ± 0,1. Среда предназначена для определения чувствительности микроорганизмов к противогрибковым препаратам и применяется только для чистых культур; состав разделён на части A и B.

Назначение

RPMI 1640 агар с MOPS и 2% глюкозы без бикарбоната натрия применяется для определения чувствительности микроорганизмов к противогрибковым препаратам.

Принцип измерения и интерпретация

Среда RPMI 1640, разработанная Moore и соавторами в Институте Розуэлл-Парк, применяется для культивирования клеток. Рецептура основана на серии сред RPMI 1630 с использованием бикарбонатной буферной системы и изменённым содержанием аминокислот и витаминов.

За последние два десятилетия увеличилась распространённость инвазивных грибковых инфекций. В связи с опасным для жизни характером этих инфекций и появлением сообщений о лекарственной устойчивости большое значение приобрело определение чувствительности дрожжевых патогенов. CLSI опубликовал референтный метод определения чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам методом разведения в бульоне. Среда RPMI 1640 Agar также предназначена для градиентно-полосового метода при исследовании видов Candida, непосредственно выделенных из колоний, выращенных на неселективных средах.

RPMI 1640 Agar может использоваться для определения значений минимальной ингибирующей концентрации (МИК) различных противогрибковых препаратов. Аминокислоты, витамины и соли обеспечивают необходимые питательные вещества; глюкоза служит источником углеводов; MOPS выполняет функцию буфера; агар является отверждающим компонентом.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,1.

Методика приготовления

Приготовление части A

1. Взвесьте 42,91 г части A и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Осторожно перемешивайте до полного растворения среды.
3. Не нагревайте.
4. Проведите стерилизующую фильтрацию через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм или менее.

Приготовление части B и смешивание компонентов

1. Взвесьте 35 г части B и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте и нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; 121 °C) в течение 15 мин.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерилизованную фильтрацией часть A к части B.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Рабочие характеристики партии проверены и стандартизированы в соответствии с действующим документом CLSI, ранее обозначавшимся как NCCLS.

Образцы

Тип образца

Клинические образцы: выделенные микроорганизмы из мочи, кала, крови и других биологических материалов.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Ограничения применения

1. Среда рекомендована только для определения чувствительности чистых культур.
2. Плотность инокулюма может влиять на размер зоны. Слишком плотный инокулюм может привести к уменьшению зон, а слишком низкая плотность инокулюма — к увеличению зон.
3. Поскольку определение чувствительности к противогрибковым препаратам проводится с использованием дисков с чувствительными веществами, необходимо соблюдать требования к хранению дисков; условия хранения могут влиять на активность диска.
4. При определённых обстоятельствах результаты определения чувствительности к антибиотикам in vitro могут не совпадать с результатами in vivo.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения части A: 2–8 °C.
• Температура хранения части B: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Требование к обращению: герметично закрывать контейнер после использования.
• Условия помещения: сухое проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.

Из-за гигроскопичности продукта при ненадлежащем хранении возможно образование комков. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие микробиологические лабораторные практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет порошка:

• Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель желтовато-зелёного