Основа агара Миддлбрука 7H9 HiMedia M197-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Основа агара Мидддлбрука 7H9 HiMedia M197-500G (уп/500 гр) производства HiMedia с конечным pH 6,6 ± 0,2. Основа предназначена для выделения, культивирования и определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis к антимикробным препаратам; перед использованием требует добавления обогащающей добавки Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018).

Назначение

Основа агара Миддлбрука 7H9 предназначена для приготовления твёрдой питательной среды для выделения и культивирования микобактерий, а также для определения чувствительности микобактерий к антимикробным препаратам. Рекомендуемый тип клинического образца — мокрота.

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2

Принцип действия и интерпретация

Твёрдые среды для культивирования микобактерий могут иметь яичную основу, как среды Лёвенштейна—Йенсена, или агаровую основу, как среды Миддлбрука. Дюбос и Миддлбрук разработали различные составы, содержащие олеиновую кислоту и альбумин. Эти компоненты защищают Mycobacterium от токсичных веществ и способствуют росту туберкулёзных бацилл.

Агаровая основа Миддлбрука 7H9, разработанная Миддлбруком и Коном, используется для культивирования микобактерий. После добавления обогащающей добавки Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018) и глицерина среда также применяется для определения чувствительности микобактерий и пересева маточных культур.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• неорганические соли способствуют росту микобактерий;
• лимонная кислота, образующаяся из цитрата натрия, удерживает неорганические катионы в растворе;
• глицерин служит источником углерода и энергии;
• Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018) содержит олеиновую кислоту, бычий альбумин, хлорид натрия, декстрозу и каталазу;
• олеиновая кислота и другие длинноцепочечные жирные кислоты необходимы для метаболизма микобактерий;
• альбумин связывает свободные жирные кислоты, часть которых токсична для микобактерий, и предотвращает их токсическое действие;
• декстроза служит источником энергии;
• каталаза нейтрализует токсичные перекиси;
• малахитовый зелёный частично подавляет рост других бактерий.

Микобактерии являются строгими аэробами, поэтому при инкубации необходимо обеспечить аэробные условия и повышенное содержание CO₂.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 9,85 г порошка в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости добавьте 1 мл глицерина.
3. Нагрейте смесь до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона обогащающей добавки Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018).
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в необходимую лабораторную посуду.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными процедурами и действующими руководствами.

Необходимо обеспечить правильный сбор образца: для анализа используется мокрота, а не слюна. При деконтаминации образца следует соблюдать осторожность. Образцы необходимо обрабатывать аккуратно, чтобы избежать контаминации.

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией стерилизуйте автоклавированием.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-зелёный однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета с зеленоватым оттенком.

Реакция среды

Реакция 1,97%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,6 ± 0,2
• диапазон pH: 6,40–6,80

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления обогащающей добавки Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018) и инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C, в плотно закрытой ёмкости
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Условия хранения: сухое, проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения
• Состояние после вскрытия: хранить в сухом виде с плотно закрытой крышкой
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке

Порошок обладает гигроскопичностью. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать, чтобы предотвратить образование комков. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта. После каждого использования контейнер следует герметично закрывать.

Эффективность среды ожидается при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в течение срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения применения

Перед измерением pH приготовленной среды необходимо выдержать среду в течение периода стабилизации. Если pH измерен сразу после приготовления и находится вне установленной спецификации, повторите измерение через некоторое время для получения окончательного значения pH.

Требования безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, указанными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания.

Следуйте установленным лабораторным процедурам обращения с инфекционными материалами. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• Основа агара Миддлбрука 7H9 HiMedia M197-500G — 500 г.

Совместимые компоненты

Для приготовления и обогащения среды используется:

• Middlebrook OADC Growth Supplement (FD018) — 1 флакон на приготовленный объём среды согласно процедуре производителя.
• Глицерин — 1 мл при необходимости.