Питательная среда HiMedia M1959-500G Улучшенный селективный агар для сальмонелл и шигелл — сухой двухкомпонентный селективный агар для выявления и выделения видов Salmonella и Shigella. Среда применяется для анализа клинических и пищевых образцов; рабочий диапазон хранения продукта составляет 10–30 °C, а автоклавирование и перегрев при приготовлении запрещены.

Назначение

Улучшенный селективный агар предназначен для селективного выявления и выделения видов Salmonella и Shigella. Типы образцов:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые образцы.

Состав

Среда поставляется в виде двух компонентов. Расход компонентов для приготовления 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами среды.

Методика приготовления

1. Взвесьте 81,93 г компонента A и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 4,6 мл компонента B.
3. Нагревайте при частом перемешивании до полного растворения среды.
4. Не автоклавируйте и не перегревайте среду. Перегрев может разрушить селективность среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Улучшенный селективный агар SS предназначен для выделения Salmonella и Shigella из клинических образцов. Среда содержит питательные компоненты, обеспечивающие микроорганизмы источниками азота и витаминами.

Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками сбраживаемых углеводов. Ксилоза включена в состав преимущественно для дифференциации видов Shigella: Shigella не сбраживает ксилозу, тогда как практически все представители кишечной группы способны её сбраживать. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы с образованием кислоты приводит к изменению окраски индикатора фенолового красного на жёлтую.

Целлобиоза ограничивает рост ложноположительных микроорганизмов, подозрительных на Salmonella. Лизин используется для дифференциации группы Salmonella и непатогенных микроорганизмов. Salmonella быстро сбраживает ксилозу и расходует её запас. После этого лизин декарбоксилируется ферментом лизиндекарбоксилазой с образованием аминов, что приводит к возврату среды к щелочному pH и имитирует реакцию Shigella.

Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красного окрашивания вокруг колоний вследствие повышения pH.

Тиосульфат натрия восстанавливается некоторыми видами энтеробактерий до сульфита и газа H₂S. Восстановительный ферментативный процесс связан с тиосульфатредуктазой. Образование H₂S выявляется по нерастворимому чёрному осадку сульфида железа, который формируется при взаимодействии H₂S с ионами железа или цитратом железа и проявляется в центре колоний.

Добавление компонента B повышает селективность среды. Компонент B избирательно подавляет рост грамположительных микроорганизмов; рост видов Proteus также снижается.

Ограничения применения

Среда обладает высокой селективностью и может оказывать токсическое действие на некоторые виды Salmonella или Shigella. Для облегчения выделения видов Shigella рекомендуется параллельно выполнять посев на менее ингибирующие среды, например на агар Хектоэна (M467) или агар с дезоксихолатом и цитратом (M065).

Контроль качества

Внешний вид

• Компонент A: светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.
• Компонент B: бесцветная или бледно-жёлтая жидкость.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция 8,65%-ного водного раствора компонента A с добавлением 0,46 мл компонента B при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч. Степень восстановления для роста бактерий на соево-казеиновом агаре принимают за 100 %.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым лабораторным руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо автоклавировать перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закры