Питательная агаризованная среда HiMedia M1927-500G MRS агар с низким pH предназначена для культивирования бактерий рода Lactobacillus и выпускается в виде порошка массой 500 г. Среда применяется для анализа клинических, пищевых и молочных образцов; конечный pH составляет 5,4 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение и область применения

Среда предназначена для культивирования всех видов Lactobacillus из различных типов образцов.

Типы образцов:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые и молочные образцы.

Состав

Расчётный состав на 1 л среды:

Конечный pH: 5,4 ± 0,2 при 25 °C.

— эквивалент мясного пептона.

— эквивалент экстракта говядины.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик среды.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 64,15 г сухой среды — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Среда MRS для Lactobacillus основана на рецептуре deMan, Rogosa и Sharpe с незначительной модификацией. Среда поддерживает обильный рост бактерий рода Lactobacillus из молочных продуктов, пищевых продуктов и других источников.

Функции компонентов:

• протеозный пептон и пептон HM B поставляют азотистые и углеродистые соединения;
• дрожжевой экстракт обеспечивает витамины группы B;
• декстроза служит ферментируемым углеводом и источником энергии;
• полисорбат 80 поставляет жирные кислоты, необходимые для метаболизма Lactobacillus;
• ацетат натрия и цитрат аммония подавляют стрептококки, плесневые грибы и многие другие микроорганизмы;
• сульфат магния и сульфат марганца обеспечивают ионы, необходимые для размножения бактерий рода Lactobacillus;
• фосфаты обеспечивают буферное действие среды.

Бактерии рода Lactobacillus являются микроаэрофильными и обычно требуют послойного нанесения среды для аэробного культивирования на твёрдых средах. После застывания среды на поверхность наливают дополнительный слой незасеянного MRS-агара, формируя послойную чашку. Изоляты Lactobacillus, полученные на MRS-агаре, необходимо дополнительно подтверждать биохимическими тестами.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от кремового до светло-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель от средне- до тёмно-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 6,42 % масс./об. при 25 °C.

pH: 5,4 ± 0,2.

Диапазон pH

5,20–5,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч или дольше в атмосфере с содержанием CO₂ 5 %.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно профильным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к росту и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.
2. Каждая партия среды проверяется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). Для любого специфического микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований.
3. Для дальнейшей идентификации необходимо выполнять дополнительные биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Хранить сухую и приготовленную среду при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывать флакон и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.