HiMedia M1925-100G Модифицированная основа HiCrome VRE агара

Питательная среда HiMedia M1925-100G Модифицированная основа HiCrome VRE агара — порошковая основа для приготовления хромогенной селективной среды. Предназначена для селективного выделения и дифференциации ванкомицин-резистентных Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium из клинических образцов; среду нельзя автоклавировать при приготовлении.

Назначение

Основа рекомендована для селективного выделения и дифференциации ванкомицин-резистентных энтерококков (Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium) из клинических образцов.

Тип образца: клинические образцы — фекалии, моча и другие материалы.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Энтерококки входят в состав нормальной микрофлоры кишечника млекопитающих. Ванкомицин-резистентные энтерококки (VRE) представляют собой группу энтерококков, выработавших устойчивость к нескольким антибиотикам, особенно к ванкомицину. Энтерококковые инфекции, вызывающие заболевания у человека, могут приводить к летальному исходу, особенно если они вызваны штаммами ванкомицин-резистентных энтерококков. Раннее выявление VRE важно для предотвращения распространения устойчивости к ванкомицину у Enterococcus faecalis.

VRE могут передаваться от человека к человеку, особенно в больницах и учреждениях длительного ухода. Микроскопические количества фекального материала инфицированного пациента или носителя могут загрязнять больничную среду и способствовать распространению инфекции. Для выявления VRE применяются традиционные питательные среды, включая основу бульона или агара для ванкомицин-резистентных энтерококков, а также желчно-эскулиновый агар с добавлением ванкомицина.

Специальный пептон обеспечивает микроорганизмы азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Феноловый красный служит индикатором pH, а арабиноза — ферментируемым углеводом.

Виды Enterococcus обладают ферментом β-глюкозидазой, который расщепляет хромогенный субстрат в составе среды с образованием синих колоний. Enterococcus faecium ферментирует арабинозу и расщепляет субстрат, образуя зелёные колонии на жёлтом фоне. Enterococcus faecalis не ферментирует арабинозу, поэтому после расщепления хромогенного субстрата образует синие колонии.

Добавление селективной добавки обеспечивает селективное выделение ванкомицин-резистентных энтерококков. Посев можно выполнять непосредственно со скринингового тампона или изолированной колонией, приготовленной в виде жидкой суспензии мутностью приблизительно 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 53,70 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое двух флаконов селективной добавки VF Selective Supplement (FD277).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Среду можно инокулировать непосредственно скрининговым тампоном либо изолированной колонией в виде жидкой суспензии мутностью приблизительно 0,5 по стандарту Мак-Фарланда.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия применения и меры предосторожности

• Назначение: для диагностики вне организма (in vitro).
• Пользователь: только квалифицированный персонал.
• Перед открытием контейнера изучите маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• При необходимости обращайтесь к паспортам безопасности отдельных компонентов и реагентов.

Ограничения метода

1. Некоторые промежуточные штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в питательных потребностях и устойчивости к ванкомицину.
2. Возможны небольшие вариации окраски в зависимости от утилизации субстрата конкретным микроорганизмом.
3. Окончательное подтверждение необходимо проводить методом определения чувствительности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовато-бежевый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красного цвета, непрозрачный.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,37 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением селективной добавки VF Selective Supplement (FD277).

*Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1925-100G
• Назначение изделия: основа
• Тип продукта: HiCrome™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2
• pH: 7,60–8,00
• Концентрация водного раствора для проверки реакции: 5,37 % масс./об.
• Температура инкубации: 35–37 °C
• Время инкубации: 24–48 ч
• Селективная добавка: VF Selective Supplement (FD277), регидратированное содержимое двух флаконов на 1000 мл среды
• Автоклавирование при приготовлении: не допускается

Хранение и срок годности

• Условия хранения порошка: 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Место хранения: сухое, проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на маркировке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в установленный срок годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Состав поставки и совместимость

Для