

HiMedia M1924-500G Основа быстрого дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes
Основа быстрого дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes HiMedia M1924-500G предназначена для экспресс-идентификации и дифференциации Listeria monocytogenes от других видов Listeria. Среда позволяет разделять виды на основе ферментации рамнозы и активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC).
Описание
Основа быстрого дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes HiMedia M1924-500G предназначена для экспресс-идентификации и дифференциации Listeria monocytogenes от других видов Listeria. Среда позволяет разделять виды на основе ферментации рамнозы и активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC).
Принцип измерения и интерпретация
Дифференциация основана на специфическом хромогенном определении активности -глюкозидазы, ферментации рамнозы и активности PIPLC.
- Общий поиск Listeria spp.: Виды Listeria гидролизуют очищенный хромогенный субстрат, в результате чего образуются колонии синего цвета. Другие микроорганизмы не используют данный субстрат и образуют белые колонии.
- Дифференциация по рамнозе: Колонии L. monocytogenes имеют сине-зелёный цвет с жёлтым ореолом (положительная реакция на рамнозу), тогда как колонии L. ivanovii остаются сине-зелёными без жёлтого ореола (отрицательная реакция).
- Дифференциация по PIPLC: Активность фосфолипазы C (PIPLC) проявляется в виде опалесцирующего (матового) ореола вокруг колоний L. monocytogenes за счёт гидролиза очищенного субстрата (добавляемого в виде добавки FD214). L. ivanovii также проявляет активность PIPLC, но легко отличается от L. monocytogenes по отсутствию ферментации рамнозы.
Роль компонентов:
- Специальный пептон, триптон и соевый пептон: источники азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов группы B и других питательных веществ.
- Рамноза: ферментируемый углевод; феноловый красный — индикатор.
- Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
- Хлорид лития и селективная добавка CA (FD181): ингибируют рост большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжей и плесеней.
Методика приготовления и использования
Приготовление среды
- Суспендируйте 35,14 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
- Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление 0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
- Охладите до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте стерильное содержимое 1 флакона обогатительной добавки LP Enrichment Supplement 1 (FD214) и стерильное регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки CA Selective Supplement (FD181).
- Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
Работа с образцами
- Тип образца: Пробы пищевых продуктов.
- Сбор и обработка: Согласно установленным руководствам по микробиологическому анализу пищевых продуктов.
- Утилизация: Загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.
Технические характеристики
Состав (г/л)
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Специальный пептон | 23,000 |
| Триптон | 10,000 |
| Соевый пептон | 2,000 |
| Хлорид натрия | 4,000 |
| Хлорид лития | 5,000 |
| Хромогенная смесь | 1,160 |
| Рамноза | 10,000 |
| Феноловый красный | 0,120 |
| Агар | 15,000 |
- Конечный pH (при 25 °C): 7,4 0,2
Общие параметры
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Происхождение компонентов | Животное |
| Тип продукта | HiCrome™ |
| Физическая форма | Порошок |
| Тип упаковки | ПНД (HDPE) |
Контроль качества
- Внешний вид: Гомогенный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
- Желирование: Плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
- Цвет и прозрачность готовой среды: Красный опалесцирующий гель.
- Реакция: pH 7,4 0,2 для 7,03 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C.
- Диапазон pH: 7,20–7,60.
Культуральные характеристики
Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки CA (FD181) и обогатительной добавки LP (FD214) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии | Ферментация рамнозы | Активность PIPLC |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Listeria innocua ATCC 33090 | 50–100 | обильный | 50 % | сине-зелёный | положительная (жёлтый фон) | отрицательная |
| Listeria ivanovii subsp. ivanovii serovar 5 ATCC 19119 | 50–100 | обильный | 50 % | сине-зелёный | отрицательная | положительная, матовый ореол вокруг колонии |
| Listeria monocytogenes ATCC 19118 | 50–100 | обильный | 50 % | сине-зелёный | положительная (жёлтый фон) | положительная, матовый ореол вокруг колонии |
| Listeria monocytogenes ATCC 13932 | 50–100 | обильный | 50 % | сине-зелёный | положительная (жёлтый фон) | положительная, матовый ореол вокруг колонии |
| Listeria monocytogenes ATCC 35152 | 50–100 | обильный | 50 % | сине-зелёный | положительная (жёлтый фон) | положительная, матовый ореол вокруг колонии |
| Bacillus spizizenii ATCC 6633 | подавлен | 0 % | - | - | - | |
| Escherichia coli ATCC 25922 | подавлен | 0 % | - | - | - | |
| Escherichia coli ATCC 8739 | подавлен | 0 % | - | - | - | |
| Enterococcus faecalis ATCC 19433 | подавлен | 0 % | - | - | - | |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 | подавлен | 0 % | - | - | - |
Ограничения и предостережения
- Индивидуальные микроорганизмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов на среде.
- Возможны незначительные отклонения в цвете в зависимости от интенсивности использования субстрата организмами.
- Каждая партия протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для специфических задач рекомендуется провести собственную валидацию среды.
- Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
Условия эксплуатации и хранения
- Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом проветриваемом месте. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание комкования.
- Хранение готовой среды: При температуре 2–8 °C.
- Срок годности: Использовать до даты, указанной на этикетке.
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|



