HiMedia M1924-100G Основа быстрого дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes

Основа быстрого дифференциального HiCrome агара для L. monocytogenes HiMedia M1924-100G предназначена для идентификации и дифференциации Listeria monocytogenes от других видов Listeria. Среда основана на определении активности β-глюкозидазы, ферментации рамнозы и активности PIPLC; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Дифференциация основана на специфическом хромогенном определении активности β-глюкозидазы, ферментации рамнозы и активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC).

Виды Listeria гидролизируют очищенный хромогенный субстрат, в результате чего образуются колонии синего цвета. Поскольку активность β-глюкозидазы специфична для рода Listeria, другие организмы не используют этот субстрат и образуют белые колонии.

Разграничение видов происходит по следующим признакам:

• Ферментация рамнозы: колонии L. monocytogenes выглядят сине-зелёными с жёлтым ореолом (положительная реакция), в то время как колонии L. ivanovii остаются сине-зелёными без жёлтого ореола (отрицательная реакция).
• Активность PIPLC: фермент фосфолипаза C гидролизует очищенный субстрат (добавляемый в виде добавки FD214), что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний Listeria monocytogenes. L. ivanovii также проявляет активность PIPLC, но легко отличается от L. monocytogenes по отсутствию ферментации рамнозы.

Роль компонентов:

• Специальный пептон, триптон и соевый пептон: источники азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов комплекса B и других питательных веществ.
• Рамноза: ферментируемый углевод; феноловый красный служит индикатором.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Хлорид лития и селективная добавка CA (FD181): подавляют рост большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжей и плесеней.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 35,14 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить стерильное содержимое 1 флакона добавки LP Enrichment Supplement 1 (FD181) и стерильное регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки CA (FD181).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Тип образцов: пищевые продукты.
• Сбор и обработка: следует использовать соответствующие методики сбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
• Утилизация: загрязнённые материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или сожжены.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании селективной добавки CA (FD181) и добавки LP Enrichment Supplement 1 (FD214) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Возможны незначительные вариации цвета в зависимости от степени использования субстрата микроорганизмами.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• При работе с культурами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологических лабораторий, использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.