HiMedia M1915-100G Основа усиленной клостридиальной среды

Порошковая основа питательной среды HiMedia M1915-100G Основа усиленной клостридиальной среды с конечным pH 5,6 ± 0,1. Применяется для подсчёта мезофильных анаэробных спор в молоке и сыре методом наиболее вероятного числа (MPN); представляет собой неселективную обогатительную среду.

Назначение

Основа усиленной клостридиальной среды рекомендована для подсчёта мезофильных анаэробных спор в образцах молока и сыра методом наиболее вероятного числа (MPN).

Состав

Конечный pH при 25 °C: 5,6 ± 0,1.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. HM-пептон B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 30,50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Отрегулируйте pH до 5,5–5,7 с помощью 20%-ного водного раствора молочной кислоты.
3. При необходимости нагрейте среду для полного растворения.
4. Добавьте 28 мл 72%-ного лактата натрия.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду по пробиркам.
6. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Основа усиленной клостридиальной среды разработана по формуле Wehr и Frank. Мезофильные спорообразующие анаэробы рода Clostridia, имеющие значение для контроля пищевых продуктов, представляют собой грамположительные, каталазоотрицательные палочки различных размеров.

Среда предназначена для инициирования роста из небольших посевных доз и получения наибольшего жизнеспособного количества клостридий. Barnes и Ingram использовали бульонную среду для разведения инокулята вегетативных клеток Clostridium perfringens. Среда может применяться:

• при исследовании спорообразующих анаэробов;
• для определения количества Clostridium butyricum в сыре;
• при подсчёте клостридий методом серийных разведений в пробирках;
• для приготовления чашек с целью выделения культур.

На среде также растут другие спорообразующие анаэробы, стрептококки и лактобациллы. Среда является неселективной обогатительной.

Триптон, дрожжевой экстракт, HM-пептон B, крахмал, L-цистеин и ацетат натрия обеспечивают клостридии источниками углерода и азота, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Небольшое количество агара способствует поддержанию низкого окислительно-восстановительного потенциала и стабилизации среды.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Образцы молочной продукции.

Отбор и обработка образцов

Для пищевых образцов и образцов молочной продукции применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открытием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• защиту глаз;
• защиту лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для подтверждающих исследований требуется дальнейший пересев культуры.

Оценка эффективности

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, при условии применения продукта в пределах срока годности и хранения при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Форма: однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 3,05%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C: pH 5,6 ± 0,1.

Диапазон pH

pH: 5,50–5,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают в анаэробной атмосфере после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Хранить порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при температуре 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывать флакон и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный контекст

В отличие от селективных сред, основа усиленной клостридиальной среды является неселективной и предназначена для обогащения мезофильных анаэробных спорообразующих микроорганизмов, включая Clostridium perfringens, Clostridium tyrobutyricum и Clostridium butyricum.