HiMedia M1909-500G Основа дважды модифицированного лизин-железного агара

Сухая питательная среда HiMedia M1909-500G Основа дважды модифицированного лизин-железного агара предназначена для селективного и дифференциального культивирования видов Salmonella. Основа применяется для выделения и идентификации Salmonella из пищевых образцов, при этом окончательное подтверждение подозрительных колоний требует серологических и биохимических тестов.

Назначение и область применения

Основа дважды модифицированного лизин-железного агара предназначена для селективного и дифференциального культивирования видов Salmonella.

Основной тип образцов: пищевые продукты.

Среда используется для выделения и идентификации Salmonella из пищевых образцов. Методика основана на способности Salmonella быстро декарбоксилировать лизин и образовывать значительное количество сероводорода (H₂S).

Состав

Для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Salmonella относится к семейству Enterobacteriaceae. Большинство сероваров имеет широкий спектр хозяев и обычно вызывает гастроэнтерит.

Многие штаммы группы быстро ферментируют лактозу, что подавляет образование H₂S на трёхсахарном железном агаре (M021). Поэтому существует вероятность, что микроорганизмы, часто выявляемые при вспышках пищевых отравлений, останутся незамеченными. Для повышения дифференциации Thatcher и Clark описали выделение видов Salmonella из пищевых продуктов на селективном агаре с последующим посевом одновременно на лизин-железный агар и трёхсахарный железный агар (M021). Совместное использование этих двух сред позволяет лучше различать колиформные микроорганизмы, например Escherichia и Shigella.

Функции компонентов среды:

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азот, углеродсодержащие соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины и другие необходимые питательные вещества.
• Декстроза (глюкоза) служит источником сбраживаемого углевода.
• Цитрат аммония и железа и тиосульфат натрия используются как индикаторы образования H₂S.
• Культуры, образующие H₂S, вызывают почернение среды вследствие образования сульфида железа.
• Декарбоксилирование лизина вызывает щелочную реакцию и фиолетовое окрашивание с образованием амина кадаверина.
• Микроорганизмы, не декарбоксилирующие лизин, образуют кислую реакцию в столбике среды с жёлтым окрашиванием.
• Микроорганизмы, дезаминирующие лизин, образуют α-кетокарбоновую кислоту. Под воздействием кислорода вблизи поверхности среды эта кислота реагирует с солью железа с образованием соединения красно-коричневого цвета.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 63,12 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не подвергайте среду автоклавированию.
4. Охладите раствор до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки № 15 (NO 15 Selective Supplement, FD101).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1909-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,50–6,90
• Условия реакции: реакция 6,31 % масс./об. водного раствора при 25 °C
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель фиолетового цвета в чашках Петри
• Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до серовато-жёлтого цвета

Контроль культуральных характеристик

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среда селективна для Salmonella и может не поддерживать рост других микроорганизмов.
2. Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
3. Окончательное подтверждение подозрительных колоний необходимо проводить серологическими и биохимическими тестами.
4. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут формировать неодинаковые картины роста на среде.
5. Для подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые характеристики и оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Условия хранения после вскрытия: хранить в сухом виде в плотно закрытой ёмкости.
• Требования к помещению: сухое, проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичными свойствами. При неплотно закрытой упаковке или ненадлежащем хранении возможно образование комков. Для сохранения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.

При работе с образцами и культурами:

• используйте защитные перчатки;
• надевайте защитную одежду;
• применяйте средства защиты глаз;
• используйте средства защиты лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с образцами;
• обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности для получения дополнительных указаний.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от стандартного трёхсахарного железного агара (M021), основа дважды модифицированного лизин-железного агара сочетает выявление декарбоксилирования или дезаминирования лизина с регистрацией образования H₂S и предназначена для дополнительной дифференциации Salmonella в пищевых образцах.