HiMedia M1909-100G Основа дважды модифицированного лизин-железного агара

Микробиологическая питательная среда HiMedia M1909-100G Основа дважды модифицированного лизин-железного агара — порошковая основа для селективного и дифференциального культивирования видов Salmonella, фасовка 100 г. Применяется для выделения и идентификации Salmonella из пищевых образцов; окончательное подтверждение подозрительных колоний выполняют серологическими и биохимическими методами.

Назначение

Основа дважды модифицированного лизин-железного агара предназначена для селективного и дифференциального культивирования видов Salmonella и их выделения из пищевых образцов.

Состав

Состав среды на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Salmonella относится к семейству Enterobacteriaceae и является одним из основных возбудителей пищевых заболеваний в различных регионах мира. Большинство сероваров имеет широкий спектр хозяев и обычно вызывает гастроэнтерит.

Дважды модифицированный лизин-железный агар применяют для выделения и идентификации Salmonella из пищевых продуктов. Salmonella быстро декарбоксилирует лизин и образует большое количество сероводорода (H₂S). Многие штаммы этой группы очень быстро ферментируют лактозу, что подавляет образование H₂S на трёхсахарном железном агаре (TSI, M021). Поэтому существует риск не обнаружить микроорганизмы, часто выявляемые при вспышках пищевых отравлений.

Для повышения дифференциации колоний Salmonella из пищевых продуктов используют селективный агар с последующим совместным посевом на лизин-железный агар и трёхсахарный железный агар (TSI, M021). Такая комбинация сред позволяет лучше различать колиформные микроорганизмы, например Escherichia и Shigella.

Функции компонентов среды:

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают поступление азота, углеродсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ.
• Декстроза (глюкоза) служит источником сбраживаемых углеводов.
• Цитрат аммония железа и тиосульфат натрия являются индикаторами образования H₂S.
• Культуры, образующие сероводород, вызывают почернение среды вследствие образования сульфида железа.
• Декарбоксилирование лизина вызывает щелочную реакцию и фиолетовое окрашивание с образованием амина кадаверина.
• Микроорганизмы, не декарбоксилирующие лизин, образуют кислую реакцию в столбике среды, которая проявляется жёлтым окрашиванием.
• Микроорганизмы, дезаминирующие лизин, образуют α-кетокарбоновую кислоту. Под воздействием кислорода эта кислота реагирует с солью железа вблизи поверхности среды с образованием красновато-коричневого соединения.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 63,12 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки № 15 (FD101).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

Тип образца: пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среда селективна для Salmonella и может не поддерживать рост других микроорганизмов.
2. Из-за различий в питательных потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.
3. Окончательное подтверждение подозрительных колоний необходимо выполнять серологическими и биохимическими тестами.
4. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут формировать вариабельные картины роста на среде.
5. Для подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,50–6,90
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 6,31 % масс./об.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для 6,31%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,7 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хран