Питательная агаровая среда HiMedia M1905-100G «Бромкрезоловый пурпурный агар с лактозой» для выделения колиформных бактерий с дифференциацией по ферментации лактозы. Применяется для анализа пищевых, молочных и водных образцов; масса упаковки составляет 100 г, температура хранения — 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для выделения колиформных бактерий из пищевых и молочных продуктов, а также из воды.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров эффективности.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация результатов

Бромкрезоловый пурпурный агар с лактозой представляет собой неизбирательную питательную среду для обнаружения и выделения колиформных бактерий, а также их дифференциации по ферментации лактозы.

Колиформные бактерии ферментируют лактозу с образованием кислоты и газа. При ферментации лактозы микроорганизмы изменяют цвет среды с пурпурного на жёлтый. Смесь пептонов и пептон HM B обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азотистых соединений, витаминами и аминокислотами. Лактоза служит источником углеводов, а бромкрезоловый пурпурный — индикатором pH.

Энтеропатогены могут передаваться через загрязнённые пищевые продукты и воду и быть причиной пищевых вспышек. Возможные последствия инфицирования у человека включают гастроэнтерит, рвоту, диарею, тошноту, недомогание и лихорадку. Энтеротоксины, продуцируемые представителями семейства Enterobacteriaceae, участвуют в патогенезе заболеваний.

Salmonella вызывает кишечные лихорадки и пищевые отравления у человека. Наиболее частые источники пищевого отравления Salmonella — мясо птицы, мясо, молоко и молочные продукты. Заражение также возможно через салаты и сырые овощи при их загрязнении. Vibrio может попадать в организм человека с загрязнёнными пищевыми продуктами или водой и вызывать кишечные инфекции и холеру.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 28,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, легко сыпучий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-пурпурного цвета.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,32 % при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Ограничения метода

1. Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, не изменяют цвет среды с пурпурного на жёлтый.
2. Для полной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые характеристики работы

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить препарат в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются лучше всего при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный контекст

Дифференциация на среде основана на ферментации лактозы с образованием кислоты и газа и сопровождается изменением цвета среды с пурпурного на жёлтый, тогда как неферментирующие лактозу микроорганизмы формируют бесцветные колонии без изменения цвета среды.