HiMedia M1904-500G Основа кровяного агара с налидиксовой кислотой

Сухая питательная среда HiMedia M1904-500G «Основа кровяного агара с налидиксовой кислотой» для дифференциации гемолитической активности стрептококков. Применяется для выделения стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков при добавлении 5 % крови; содержит налидиксовую кислоту для подавления роста большинства грамотрицательных бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой высокопитательный субстрат для требовательных микроорганизмов, нуждающихся в дополнительных строительных молекулах для выживания. Микроорганизмы, вырабатывающие гемолизин, создают видимые зоны гемолиза на данной среде.

Добавление налидиксовой кислоты позволяет ингибировать сопутствующую флору, блокируя репликацию ДНК чувствительных бактерий, что способствует селективному росту стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков (при условии добавления 5 % крови).

Компоненты среды:

• Инфузарт HMH и пептон HM: богатые источники углерода, азота, аминокислот, витаминов и минералов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Кровь (добавляется отдельно): служит дополнительным источником факторов роста и основой для определения гемолитических реакций. Характер гемолиза может варьироваться в зависимости от вида животного, чья кровь используется, и типа базовой среды.

Область применения

• Тип образца: клинический материал (фекалии).
• Назначение: дифференциация гемолитической активности стрептококков и выделение селективных групп микроорганизмов.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 40,04 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2.
• Формула стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.
• Эквивалент сердечному инфузарту и мясному пептону.

Общие параметры

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5–7 % стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.
• Реакция: pH 4,25 % (масс/об) водного раствора при 25 °C составляет 7,3 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5–7 % стерильной дефибринированной крови овец после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения применения

1. Для обнаружения гемолиза рекомендуется использовать кровь овец. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление крови лошади или кролика поддерживает рост H. haemolyticus, однако колонии напоминают бета-гемолитические стрептококки, что требует дополнительного подтверждения.
3. Характер гемолиза зависит от источника используемой крови.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в диагностике in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: Загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.