HiMedia M1904-100G Основа кровяного агара с налидиксовой кислотой

Сухая питательная среда HiMedia M1904-100G «Основа кровяного агара с налидиксовой кислотой» для дифференциации гемолитической активности стрептококков. Применяется для выделения стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков при добавлении 5 % крови; содержит налидиксовую кислоту для подавления роста большинства грамотрицательных бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой высокопитательный субстрат для требовательных микроорганизмов, нуждающихся в дополнительных клеточных строительных блоках для выживания. Микроорганизмы, вырабатывающие гемолизин, создают видимые зоны гемолиза на данной среде.

Налидиксовая кислота в составе основы блокирует репликацию ДНК чувствительных бактерий, выступая ингибитором для сопутствующей флоры (преимущественно грамотрицательных бактерий) и поддерживая рост стафилококков, гемолитических стрептококков и энтерококков при дополнении среды кровью.

Компоненты среды:

• Инфузия HMH и пептон HM: богатые источники углерода, азота, аминокислот, витаминов и минералов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Кровь (добавляется отдельно): дополнительный источник факторов роста и основа для определения гемолитических реакций.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,04 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами

• Тип образца: клинический материал (фекалии).
• Сбор и обработка проб должны проводиться в соответствии с установленными руководствами по работе с клиническими образцами.
• После использования загрязненные материалы подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5–7 % стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишнево-красного цвета.
• Реакция: pH 4,25 % (масс/об) водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают при добавлении 5–7 % стерильной дефибринированной крови овец после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

(*) — соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавление крови овец. Среда не поддерживает рост H.haemolyticus.
2. Добавление крови лошади или кролика поддерживает рост H.haemolyticus, однако колонии напоминают бета-гемолитические стрептококки, что требует дополнительного подтверждения.
3. Характер гемолиза может варьироваться в зависимости от источника используемой крови.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков.
• Требования к помещению: сухое вентилируемое помещение, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.