HiMedia M1899-500G Модифицированный агар Рогозы

Сухая селективная питательная среда HiMedia M1899-500G Модифицированный агар Рогозы предназначена для выделения лактобацилл из пищевых и клинических образцов. Применяется для селективного культивирования молочнокислых бактерий; среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Модифицированный агар Рогозы рекомендуется для селективного культивирования Lactobacillus из пищевых и клинических образцов.

Типы образцов

• Клинические образцы: зубной кариес.
• Пищевые образцы.
• Образцы молочных продуктов.

Состав

Состав рассчитан на 1 л питательной среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения установленных рабочих характеристик.

• Эквивалентная масса обезвоженной среды: 74,40 г/л.
• Конечный pH после добавления ледяной уксусной кислоты при 25 °C: 6,2 ± 0,1.

Принцип действия и интерпретация

Агар Рогозы представляет собой преимущественно селективную среду для культивирования Lactobacillus. Высокая концентрация ацетата и низкий pH эффективно подавляют рост других бактерий, а также многих штаммов других молочнокислых бактерий.

Изменение pH среды до 6,2 вместо 5,5 изменяет её селективность по отношению ко всей группе молочнокислых бактерий.

• Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые соединения, серу, микроэлементы и витамины группы B, необходимые для роста лактобацилл.
• Глюкоза служит сбраживаемым углеводом.
• Полисорбат 80 является источником жирных кислот.
• Цитрат аммония и ацетат натрия подавляют плесневые грибы, стрептококки и многие другие микроорганизмы.
• Монокалийфосфат обеспечивает буферную способность среды.
• Сульфат магния, сульфат марганца и сульфат железа являются источниками неорганических ионов.
• Низкий pH среды и добавление уксусной кислоты обеспечивают селективность по отношению к лактобациллам и подавляют другую бактериальную флору.
• Высокая концентрация ацетата и кислая реакция среды подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий.

Для инкубации посевов рекомендуется использовать атмосферу из 95 % водорода и 5 % углекислого газа: при 30 °C в течение 5 суток или при 37 °C в течение 3 суток.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 74,40 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. При температуре около 50 °C отрегулируйте pH примерно до 6,2 с помощью ледяной уксусной кислоты. Ориентировочный объём кислоты — 1,32 мл.
4. Тщательно перемешайте раствор.
5. Нагрейте среду до 95 °C и выдерживайте 3 мин.
6. Не автоклавируйте среду.
7. Охладите среду до 45–50 °C.
8. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия культивирования

• Атмосфера: 95 % водорода и 5 % углекислого газа.
• Рекомендуемый режим 1: 30 °C, 5 суток.
• Рекомендуемый режим 2: 37 °C, 3 суток.

Контроль качества

Внешний вид

Однородные мягкие комки от кремового до жёлтого цвета, легко разрушающиеся до порошкообразного состояния.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 7,44%-ного водного раствора по массе/объёму с ледяной уксусной кислотой при 25 °C:

• pH: 6,2 ± 0,1.

Диапазон pH

• pH: 6,10–6,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 5 % углекислого газа (CO₂) и 95 % водорода (H₂) после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Примечание: звёздочкой отмечены соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. На среде могут расти бактерии, устойчивые к низкому pH.
2. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую интенсивность роста на среде.
3. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется провести валидацию с учётом специфических требований пользователя.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Продукт предназначен для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты