HiMedia M1898-500G Основа быстрой среды для Perfringens (Twin pack)

Основа быстрой среды для Clostridium perfringens HiMedia M1898-500G (Twin pack) представляет собой двухкомпонентную сухую питательную среду для экспресс-детекции бактерий Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Среда предназначена для инициации роста при малых посевных дозах и получения максимального числа жизнеспособных клостиридий; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда Rapid Perfringens Medium Base разработана по методике Эриксона и Дейбела. Она представляет собой жидкую среду на основе лакмусного молока, разлитую в пробирки.

Мезофильные спорообразующие анаэробы рода Clostridia, представляющие интерес при анализе пищевых продуктов, являются грамположительными, каталаза-отрицательными палочками различного размера. Селективность среды обеспечивается добавлением антибиотиков сульфата полимиксина B и сульфата неомицина, а также инкубацией при температуре 46 °C.

Основные компоненты и их функции:

• Триптон и дрожжевой экстракт: источники аминокислот, сложных азотистых и углеродистых веществ, витаминов группы B.
• Глюкоза: энергетический ресурс.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
• Дикалийгидрофосфат: буфер для контроля pH.
• L-цистин: источник незаменимых факторов роста.
• Тиогликолят натрия и L-цистин: снижение окислительно-восстановительного потенциала среды за счет удаления кислорода и поддержание низкого pH. Тиогликолят натрия также нейтрализует токсическое действие ртутных консервантов.

Интерпретация результата: ферменты Clostridium perfringens атакуют белки и углеводы молока, вызывая «бурную» ферментацию с образованием сгустков и газа.

Методика проведения анализа

Приготовление компонентов

1. Раствор части А:

   • Растворить 70 г порошка части А в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • Тщательно перемешать и довести pH до 6,8.
   • Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 5 минут.
   • Охладить до 45–50 °C и в асептических условиях добавить стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки PN (FD307).

2. Раствор части B:

   • Растворить 110 г порошка части B в 500 мл подогретой очищенной или дистиллированной воды.
   • Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
   • Довести pH до 7,1.
   • Разлить по 5 мл в стеклянные пробирки с завинчивающимися крышками.
   • Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
   • Охладить до 45–50 °C.

3. Смешивание и хранение:

   • В асептических условиях добавить 5 мл предварительно охлажденного раствора части А в каждую пробирку с частью B.
   • Тщательно перемешать и хранить при температуре 2–8 °C.
   • Перед использованием разжижить среду, выдержав пробирки на водяной бане при 45–50 °C в течение 30 минут.

Работа с образцами

• Тип образца: пищевые продукты.
• Сбор и обработка: сбор и подготовка проб должны осуществляться в соответствии с установленными руководствами по микробиологическому анализу пищевых продуктов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

Контроль качества

Внешний вид и pH

• Часть А: однородный свободнотекучий порошок от розовато-пурпурного до серого цвета.
• Часть B: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Готовая среда: непрозрачный раствор светло-коричневого цвета в пробирках.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.
• Реакция: pH 7,0 $\pm$ 0,2 при 25 °C для смеси 7,0 % (м/об) части А и 11,0 % (м/об) части B.

Культуральные характеристики

Характеристики определены в анаэробной атмосфере с добавлением селективной добавки PN (FD307) после инкубации при 46 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в их трофических потребностях.
• Меры безопасности: использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.