HiMedia M1898-500G Основа быстрой среды для Perfringens (Twin pack)

Порошковая основа питательной среды HiMedia M1898-500G Основа быстрой среды для Perfringens (Twin pack) — двухкомпонентный препарат для микробиологического анализа пищевых продуктов. Предназначена для быстрого выявления Clostridium perfringens и может обеспечивать слабый рост отдельных штаммов из-за различий в их пищевых потребностях.

Назначение

Основа быстрой среды для Clostridium perfringens предназначена для быстрого выявления микроорганизма в пищевых продуктах.

Тип образца

• Образцы пищевых продуктов.

Состав

Состав каждой части на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 70 г части A в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Тщательно перемешайте и отрегулируйте pH до 6,8.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 5 мин.
4. Охладите раствор до 45–50 °C и асептически добавьте стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки PN Selective Supplement (FD307).
5. Суспендируйте 110 г части B в 500 мл тёплой очищенной или дистиллированной воды.
6. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
7. Отрегулируйте pH до 7,1.
8. Разлейте по 5 мл в стеклянные пробирки с завинчивающимися крышками.
9. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
10. Охладите до 45–50 °C.
11. Асептически добавьте к части B 5 мл предварительно охлаждённого раствора части A.
12. Тщательно перемешайте и храните при 2–8 °C.
13. Перед использованием разжижайте среду, помещая пробирки на 30 мин в водяную баню с температурой 45–50 °C.

Принцип действия и интерпретация

Rapid Perfringens Medium Base разработана Erickson и Deibel для выявления Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Мезофильные спорообразующие анаэробы рода Clostridia, имеющие значение для пищевой микробиологии, представляют собой грамположительные палочки различного размера с отрицательной каталазной реакцией.

Среда может использоваться для инициирования роста из небольших посевных доз и получения наиболее высокого жизнеспособного количества клостридий. Rapid Perfringens Medium Base представляет собой жидкую среду на основе лакмусового молока, которую готовят в пробирках.

Селективность обеспечивается антибиотиками — сульфатом полимиксина B и сульфатом неомицина — в сочетании с инкубацией при температуре 46 °C.

• Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают аминокислотами, другими сложными азотистыми и углеродистыми соединениями, а также витаминами группы B.
• Глюкоза служит источником энергии.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Двухосновный фосфат калия действует как буфер и регулирует pH.
• L-цистин является аминокислотой и одновременно служит источником необходимых факторов роста.
• Тиогликолят натрия и L-цистин снижают окислительно-восстановительный потенциал среды за счёт удаления кислорода, поддерживая низкий pH.
• Тиогликолят натрия также способствует нейтрализации токсического действия ртутных консервантов.

В культурах на лакмусовом молоке ферменты Clostridium perfringens разрушают белки и углеводы молока, вызывая бурное брожение с образованием сгустка и газа.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный, сыпучий порошок от розовато-фиолетового до серого цвета.
• Часть B: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Светло-коричневый непрозрачный раствор в пробирках.

Реакция

Реакция 7,0 % масс./об. части A + 11,0 % масс./об. части B при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробной атмосфере с добавлением селективной добавки PN Selective Supplement (FD307) после инкубации при 46 °C в течение 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого препарата: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия препарат необходимо хранить в сухом виде в плотно закрытом флаконе, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики препарата сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригод