HiMedia M1897-500G Модифицированная основа агара Листерия Оксфорд

Питательная среда HiMedia M1897-500G Модифицированная основа агара Листерия Оксфорд производства HiMedia — порошкообразная основа с температурой хранения 10–30 °C. Среда предназначена для селективного выделения и культивирования видов Listeria из пищевых, клинических и водных образцов; для селективности перед использованием добавляют восстановленное содержимое одного флакона ColCef Selective Supplement (FD306).

Назначение

Модифицированная основа агара Листерия Оксфорд применяется для селективного выделения и культивирования видов Listeria из следующих типов образцов:

• клинические образцы: кровь и биологические жидкости;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — единственный вид рода Listeria, имеющий значение как возбудитель заболеваний человека. Listeria seeligeri, Listeria welshimeri и Listeria ivanovii связаны с заболеваниями животных. Все виды Listeria являются патогенными для овец и крупного рогатого скота. Положительная диагностика листериоза возможна только при выделении и культивировании ответственных бактерий из образцов крови или спинномозговой жидкости поражённых организмов.

Основа среды Листерия Оксфорд разработана на основе состава, описанного Curtis и соавторами, для выделения L. monocytogenes из клинических и пищевых образцов. Модифицированная основа среды Листерия Оксфорд представляет собой вариант среды Листерия Оксфорд, в котором концентрация хлорида лития снижена до 12 г/л для обеспечения роста чувствительных видов Listeria. В качестве селективных агентов используются цефтазидим и сульфат колистина вместо акрифлавина, циклогексимида, цефотетана и фосфомицина, применяемых в основе среды Листерия Оксфорд.

Специальный пептон служит источником необходимых питательных веществ для микроорганизмов. Кукурузный крахмал нейтрализует образующиеся токсичные метаболиты. Хлорид лития и антибиотики подавляют грамотрицательные бактерии и большинство грамположительных микроорганизмов.

L. monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с ионами железа, в результате чего вокруг колоний образуются чёрные зоны. Селективность среды достаточна для выделения и дифференциации микроорганизмов методом прямого поверхностного посева, однако рекомендуется предварительно разводить посевной материал; при высокой загрязнённости образца предварительное разведение особенно желательно. Для лучшего восстановления микроорганизмов рекомендуется инкубация при 30 °C. Образец обогащают в обогатительной среде, после чего выполняют выделение на модифицированной основе среды Листерия Оксфорд.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 52,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона ColCef Selective Supplement (FD306).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или тёмно-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель тёмно-янтарного цвета с голубоватым оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,25 % при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления ColCef Selective Supplement (FD306) и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различные варианты роста на среде.