Микробиологическая питательная среда HiMedia M1896-500G Основа дифференциального агара для энтерококков (TIT) — порошковая основа для селективного выделения и дифференциации Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium по окраске колоний. Применяется для анализа пищевых и молочных образцов; рабочая среда имеет конечный pH 6,05 ± 0,05 и требует добавления регидратированного 1%-ного раствора TTC.

Назначение

Основа предназначена для приготовления дифференциального агара для энтерококков и рекомендована для дифференциации Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium. Тип образцов: пищевые продукты и молочные образцы.

Состав

Состав рассчитан на 1 л очищенной или дистиллированной воды:

— эквивалент мясного экстракта.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 6,05 ± 0,05.

Принцип дифференциации

Энтерококки ранее классифицировались как фекальные стрептококки. Энтерококки используют как индикаторные микроорганизмы при контроле пищевых образцов, поскольку их присутствие может указывать на фекальное загрязнение. Среди различных видов энтерококков E. faecalis и E. faecium часто обнаруживаются у человека.

Для выделения видов рода Enterococcus применяют различные селективные питательные среды. Основа дифференциального агара для энтерококков предназначена для селективного выделения и дифференциации Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium. Дифференциация основана на восстановлении тетразолия:

• Enterococcus faecalis образует колонии с тёмно-красным центром и узкой белой периферией;
• Enterococcus faecium образует бесцветные или бледно-розовые колонии.

Протеозопептон и пептон HM B служат источниками азота, углерода, аминокислот с длинной цепью и витаминов. Глюкоза является источником углеводов. Ацетат таллия используется как селективный ингибирующий агент.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 43 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует примерно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона 1%-ного раствора TTC (FD057).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,4%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция: реакция 4,30%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C; pH 6,05 ± 0,05.

Диапазон pH: 6,00–6,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 1%-ного раствора TTC (FD057) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• — соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животного происхождения
• Упаковка: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 500 г
• Расход: 43 г на 1000 мл воды
• Конечный pH при 25 °C: 6,05 ± 0,05
• Диапазон pH: 6,00–6,10
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами. При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами. Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Совместимые реагенты

• 1%-ный раствор TTC, флакон FD057 — добавляется после охлаждения стерилизованной основы до 45–50 °C.

Сравнительное техническое отличие

Дифференциация на этой среде основана на восстановлении тетразолия с образованием красных или бордовых колоний Enterococcus faecalis, тогда как Enterococcus faecium формирует бесцветные колонии; Escherichia coli и Lactococcus lactis в контрольных условиях подавляются.