HiMedia M1895-500G Основа кровяного агара для L. monocytogenes (LMBA)

Основа кровяного агара для L. monocytogenes (LMBA) HiMedia M1895-500G предназначена для селективного выделения и культивирования видов Listeria из пищевых и экологических проб. Среда используется для дифференциации гемолитических патогенных видов (включая L. monocytogenes) от негемолитических непатогенных видов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

L. monocytogenes представляет собой грамположительную факультативно анаэробную палочковидную бактерию, способную расти при низких температурах, что делает её критически важным объектом контроля в пищевой промышленности.

Основа L.mono Blood Agar разработана для изоляции видов Listeria на базе триптон-соевого агара с добавлением хлорида лития в качестве селективного агента. При добавлении 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы среда позволяет дифференцировать гемолитические патогенные виды (L. monocytogenes, L. seeligeri и L. ivanovii) от негемолитических непатогенных видов (L. innocua, L. grayi и L. welshimeri).

Роль компонентов:

• Триптон и соевый пептон: обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие питательные вещества.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Хлорид лития, цефтазидим и сульфат полимиксина B: обеспечивают дополнительную селективность среды.

Интерпретация результатов:

• L. monocytogenes: матовые колонии диаметром 2 мм с узкими зонами гемолиза.
• L. ivanovii: матовые колонии диаметром 2 мм, окружённые широкой зоной гемолиза.
• L. innocua: колонии диаметром 2 мм без зоны гемолиза.

Методика приготовления и анализа

1. Суспендируйте 50 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы и содержимое одного флакона селективной добавки для L. mono (FD305).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Финальный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или очень слабо опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: вишнёво-красный непрозрачный гель.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались в аэробной атмосфере с добавлением селективной добавки (FD305) и 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и работа с образцами

Среда рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. При сборе и обработке образцов следует руководствоваться соответствующими отраслевыми стандартами.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Некоторые организмы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательном составе.
• При работе с образцами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.