HiMedia M1895-500G Основа кровяного агара для L. monocytogenes (LMBA)
Микробиологическая селективно-дифференциальная питательная среда HiMedia M1895-500G Основа кровяного агара для L. monocytogenes (LMBA) в форме порошка, предназначенная для приготовления кровяного агара. Применяется для выделения и культивирования видов Listeria из пищевых и образцов окружающей среды; масса упаковки — 500 г, температура хранения — 10–30 °C.
Описание
Микробиологическая селективно-дифференциальная питательная среда HiMedia M1895-500G Основа кровяного агара для L. monocytogenes (LMBA) в форме порошка, предназначенная для приготовления кровяного агара. Применяется для выделения и культивирования видов Listeria из пищевых и образцов окружающей среды; масса упаковки — 500 г, температура хранения — 10–30 °C.
Назначение
Основа кровяного агара для специфического выделения и культивирования видов Listeria из пищевых продуктов и образцов окружающей среды, включая пищевые и молочные образцы.
Состав
Состав на 1 л среды:
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Триптон | 15,000 |
| Соевый пептон | 5,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Хлорид лития | 10,000 |
| Агар | 15,000 |
Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.
Приготовление среды
- Взвесьте 50 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте стерильную дефибринированную овечью кровь в концентрации 5 % об./об. и восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки для L. monocytogenes FD305.
- Тщательно перемешайте.
- Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Listeria monocytogenes — грамположительная палочковидная факультативно-анаэробная бактерия. Микроорганизм способен расти при охлаждении, поэтому представляет существенную проблему для пищевой промышленности. Выделение Listeria из пищевых продуктов и образцов окружающей среды характеризуется низкой эффективностью, вследствие чего требуется предварительное обогащение с последующим выделением.
Основа кровяного агара для L. monocytogenes разработана Johansson и Kankare для выделения видов Listeria. Основой среды служит триптон-соевый агар; хлорид лития выполняет функцию селективного агента. После добавления 5 % стерильной дефибринированной овечьей крови среда позволяет дифференцировать гемолитические и патогенные виды Listeria, включая L. monocytogenes, L. seeligeri и L. ivanovii, от негемолитических и непатогенных видов, включая L. innocua, L. grayi и L. welshimeri.
Функции компонентов:
- Триптон и соевый пептон обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми для роста веществами.
- Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
- Хлорид лития, цефтазидим и сульфат полимиксина B обеспечивают дополнительную селективность среды.
Характерные признаки роста:
- L. monocytogenes образует тусклые колонии диаметром 2 мм с узкими зонами гемолиза.
- L. ivanovii образует тусклые колонии диаметром 2 мм, окружённые широкой зоной гемолиза.
- L. innocua образует колонии диаметром 2 мм без зоны гемолиза.
Образцы
Тип образцов: пищевые и молочные продукты.
Сбор и обращение с образцами
Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
- Базовая среда: прозрачный гель светло-янтарного цвета с отсутствующей или очень слабой опалесценцией.
- После добавления 5 % об./об. стерильной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.
Реакция среды
Реакция 5,0%-ного масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.
Диапазон pH
pH: 7,10–7,50.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют в аэробной атмосфере с добавлением селективной добавки для L. monocytogenes FD305 и 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Гемолиз |
|---|---|---|---|---|
| Listeria monocytogenes ATCC 19112 | 50–100 | хороший — обильный | ≥50 % | узкая зона гемолиза |
| Listeria monocytogenes ATCC 19117 | 50–100 | хороший — обильный | ≥50 % | узкая зона гемолиза |
| Listeria monocytogenes subsp. serovar 1 ATCC 19111 (00020*) | 50–100 | хороший — обильный | ≥50 % | узкая зона гемолиза |
| Listeria ivanovii subsp. ivanovii serovar 5 ATCC 19119 (00018*) | 50–100 | хороший — обильный | ≥50 % | широкая зона гемолиза |
| Listeria innocua ATCC 33090 (00017*) | 50–100 | хороший — обильный | ≥50 % | гемолиз отсутствует |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | ≥10⁴ | рост подавлен | 0 % | |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) | 50–100 | отсутствует — слабый | 0–10 % | |
| Proteus mirabilis ATCC 25933 | 50–100 | отсутствует — слабый | 0–10 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Ограничения применения
Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
Условия хранения и срок годности
- Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
- Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
- Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
- После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
- Неправильное хранение может привести к образованию комков.
- Место хранения: сухое проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
- После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
- Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.
Требования безопасности
Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами. Требования безопасности могут быть приведены в индивидуальных паспортах безопасности.
Утилизация
Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.
При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Модель/артикул: M1895-500G
- Назначение изделия: основа кровяного агара для L. monocytogenes
- Физическая форма: порошок
- Происхождение: животное
- Тип продукта: стандартный
- Тип упаковки: HDPE
- Масса: 500 г
- Температура хранения порошка: 10–30 °C
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
- Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
- Диапазон pH: 7,10–7,50
Отличие от неспецифических питательных сред заключается в сочетании основы триптон-соевого агара, хлорида лития, селективной добавки FD305 и 5 % стерильной дефибринированной овечьей крови для селекции и дифференциации видов Listeria по гемолизу.
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|
