ТЦЖС агар HiMedia M189-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда ТЦЖС агар HiMedia M189-500G (уп/500 гр) — порошкообразный агар для селективного выделения и культивирования вибрионов. Применяется для исследования клинических, пищевых и водных образцов, при этом среда подавляет рост многих грамположительных бактерий и колиформных микроорганизмов.

Назначение

ТЦЖС агар предназначен для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов, вызывающих холеру и пищевые отравления, из клинических образцов, пищевых продуктов и воды.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Методические документы: МР 02.009-06, Саратов, 2006

Состав

Расчётный состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

ТЦЖС агар разработан Kobayashi и соавторами, модифицировавшими селективную среду Nakanishi. Среда первоначально предназначалась для выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus, однако большинство вибрионов образуют на ней крупные обильные колонии с различной морфологией.

Среда также рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для селективного выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus. Для выделения Vibrio cholerae обычно применяют предварительное обогащение в щелочной пептонной воде M618 с последующим высевом на ТЦЖС агар.

Функции компонентов среды:

• Протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые соединения, витамины группы B и другие необходимые питательные вещества для роста.
• Желчь, производное желчных солей, и цитрат натрия подавляют грамположительные бактерии и колиформные микроорганизмы.
• Тиосульфат натрия служит источником серы; совместно с цитратом железа он позволяет выявлять образование сероводорода H₂S.
• Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для выявления метаболизма вибрионов.
• Бромтимоловый синий и тимоловый синий выполняют функцию индикаторов pH.
• Щелочное значение pH среды улучшает выделение Vibrio cholerae.

Вибрионы, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии. Штаммы Vibrio cholerae формируют жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы. Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии. Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и поэтому формирует сине-зелёные колонии; аналогичные колонии образует Vibrio vulnificus.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 89,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии и другие образцы.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.

Ограничения метода

1. Фекальные образцы следует наносить на среду в большом количестве, поскольку рост некоторых видов может подавляться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на ТЦЖС агаре сине-зелёные колонии.
3. Сахарозоферментирующие виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. ТЦЖС агар не подходит для проведения оксидазного теста у видов Vibrio.
5. Отдельные штаммы Vibrio cholerae могут выглядеть на ТЦЖС агаре зелёными или бесцветными из-за замедленной ферментации сахарозы.
6. ТЦЖС агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любую колонию на ТЦЖС агаре, не образующую H₂S, можно рассматривать как предположительно положительную на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Реакция и pH

• Реакция: 8,9 % мас./об. водного раствора при 25 °C.
• pH: 8,6 ± 0,2.
• Диапазон pH: 8,40–8,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.