HiMedia M189-100G TCBS агар

Селективная питательная среда HiMedia M189-100G TCBS агар производства HiMedia для выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio из клинических, пищевых и водных образцов. Агар применяют для микробиологического контроля и дифференциации вибрионов по ферментации сахарозы; хранение сухого препарата — при 10–30 °C.

Назначение

HiMedia M189-100G TCBS агар рекомендован для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio, вызывающих пищевые отравления, из клинических образцов и пищевых продуктов.

Типы образцов:

• Клинические образцы: фекалии и другие материалы.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 8,6 ± 0,2.
• Реакция: 8,9 % масс./об. водного раствора при 25 °C; pH 8,6 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

TCBS агар разработан Kobayashi и соавторами, модифицировавшими селективную среду Nakanishi. Изначально среда предназначалась для выделения V. cholerae и V. parahaemolyticus, однако большинство видов Vibrio формируют на ней крупные полноценные колонии с различной морфологией. TCBS агар также рекомендован APHA для селективного выделения V. cholerae и V. parahaemolyticus. Для выделения V. cholerae обычно применяют обогащение в щелочной пептонной воде M618 с последующим высевом на TCBS агар.

• Протеозный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами.
• Желчь, являющаяся производным желчных солей, и цитрат натрия подавляют грамположительные бактерии и колиформные микроорганизмы.
• Тиосульфат натрия служит источником серы; в сочетании с цитратом железа он позволяет выявлять образование сероводорода.
• Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для оценки метаболизма видов Vibrio.
• Виды Vibrio, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии.
• Бромтимоловый синий и тимоловый синий выполняют функцию индикаторов pH.
• Щелочной pH среды улучшает восстановление V. cholerae.
• Штаммы V. cholerae образуют на TCBS агаре жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы.
• V. alginolyticus также образует жёлтые колонии.
• V. parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и поэтому образует сине-зелёные колонии; аналогичный цвет характерен для V. vulnificus.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 89,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Фекальные образцы следует высевать в большом объёме или с высокой посевной нагрузкой, поскольку рост некоторых видов может подавляться в результате ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут формировать на TCBS агаре сине-зелёные колонии.
3. Сахарозоферментирующие виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. TCBS агар не подходит для проведения оксидазного теста видов Vibrio.
5. Некоторые штаммы V. cholerae могут выглядеть на TCBS агаре зелёными или бесцветными из-за замедленной ферментации сахарозы.
6. TCBS агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любую колонию на TCBS агаре, не образующую H₂S, можно рассматривать как предположительно положительную на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Диапазон pH

• pH: 8,40–8,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Proteus hauseri ранее был известен как Proteus vulgaris.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Контейнер: плотно закрытый.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните препарат в сухом виде в плотно закрытом флаконе для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при рекомендованной температуре хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техничес