HiMedia M1880-500G Пиразинамидазный агар

Сухая питательная среда HiMedia M1880-500G Пиразинамидазный агар для идентификации видов Yersinia в соответствии с методикой FDA BAM. Применяется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции, неохлорированной воды и животных отходов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда используется для дифференциации потенциально патогенных и непатогенных штаммов Y. enterocolitica в рамках программ эпидемиологического надзора. В основе метода лежит определение активности фермента пиразинамидазы: под действием этого фермента субстрат пиразин-карбоксамид превращается в пиразиновую кислоту. При добавлении свежеприготовленного 1 % раствора сульфата железа-аммония на поверхность скоса происходит реакция с образованием розового окрашивания, что свидетельствует о положительном результате теста.

Компоненты среды:

• Триптон, соевый пептон и дрожжевой экстракт: обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Пиразин-карбоксамид: служит субстратом для обнаружения активности пиразинамидазы.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 34,00 г порошка в 1000 мл 0,2 М трис-малеатного буфера (pH 6,0).
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по 5 мл в пробирки размером 16 × 125 мм.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. После стерилизации охладите пробирки в наклонном положении для формирования скоса.

Процедура тестирования

1. Инкубируйте культуру на скосах пиразинамидазного агара при комнатной температуре до полного роста.
2. Залейте на скос 1 мл свежеприготовленного 1 % раствора сульфата железа-аммония.
3. Оцените результат через 15 минут.
4. Появление розового цвета указывает на положительный тест (наличие пиразиновой кислоты).

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,13 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках в виде скоса).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 25–30 °C в течение 48 часов. После инкубации на скос добавляют 1 мл 1 % свежеприготовленного раствора сульфата железа-аммония.

Область применения

Среда рекомендована для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые и молочные продукты.
• Животные отходы.
• Нехлорированная вода.

Ограничения и предостережения

• Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обезврежены путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по утилизации инфекционных материалов.