HiMedia M188-100G Основа D.T.M. агара (агар для тестирования дерматофитов)

Основа D.T.M. агара (агар для тестирования дерматофитов) HiMedia M188-100G — селективная дифференциальная среда для выделения дерматофитов. Применяется для идентификации грибов родов Trichophyton, Microsporum и Epidermatophyton по морфологии колоний и способности вырабатывать щелочные метаболиты.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана по методу Таплина для обнаружения и идентификации дерматофитов, вызывающих кожные инфекции (стригущий лишай). Идентификация основана на морфологии колоний и продукции щелочных метаболитов, которые повышают pH среды, вызывая изменение цвета индикатора фенолового красного с жёлтого на розово-красный.

Роль компонентов

• Соевый пептон: источник азота и углерода, необходимых для роста.
• Глюкоза: энергетический субстрат.
• Феноловый красный: индикатор для обнаружения продукции аминов.
• Циклогексимид (добавляется в виде добавки FD015): подавляет рост большинства сапрофитных грибов.
• Гентамицин: ингибирует грамотрицательные бактерии, включая виды Pseudomonas.
• Хлортетрациклин: подавляет широкий спектр грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Интерпретация результатов

• Положительный результат: рост колоний с изменением цвета среды с жёлтого на красный. Быстрорастущие виды могут вызвать полное изменение цвета в течение 3 суток, медленнорастущие — за более длительный период.
• Отрицательный результат: отсутствие изменения цвета среды (характерно для недерматофитов).
• Особенности: некоторые сапрофиты, дрожжи и бактерии могут изменить цвет среды на красный, однако они легко дифференцируются по морфологии колоний. Окончательная классификация требует микроскопического исследования, а также биохимических и серологических тестов.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 20,10 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона селективной добавки CCG (FD015).
6. Тщательно перемешать перед разливом в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами

• Типы проб: клинические образцы (соскобы кожи, волосы, поражения ногтей, чешуйки с пораженного волосистого покрова головы).
• Обращение: сбор и транспортировка проб должны осуществляться согласно установленным руководствам. Контаминированные материалы после использования подлежат автоклавированию перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 5,5 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: оранжево-красный, слегка опалесцирующий гель.
• Реакция 4% водного раствора (при 25 °C): pH 5,5 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 5,30–5,70.

Культуральные характеристики

Результаты получены при использовании селективной добавки CCG (FD015) после инкубации при 25–30 °C в течение 6 суток.

Ограничения и предостережения

• Ложноположительные реакции: возможны при интерпретации результатов более чем через 6 суток инкубации.
• Ложноотрицательные реакции: могут возникнуть при посеве из латентных (неактивных) зон инфекции.
• Контаминация: при сильном загрязнении пробы сапрофитные грибы могут вызвать изменение цвета среды.
• Меры безопасности: только для диагностики in vitro и профессионального использования. Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.