HiMedia M1878-100G Агар для Vibrio vulnificus (VVA)

Селективный агар для Vibrio vulnificus (VVA) HiMedia M1878-100G предназначен для идентификации данной бактерии в соответствии с методикой FDA BAM, 1998. Среда применяется для анализа образцов пищевых продуктов и молочной продукции; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Агар для Vibrio vulnificus используется для идентификации Vibrio vulnificus в пищевых пробах с последующим олигонуклеотидным анализом согласно FDA BAM, 1998.

Принцип работы компонентов среды:

• Пептон: обеспечивает необходимые азотистые соединения.
• Целлобиоза: служит ферментируемым источником углерода.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Бромтимоловый синий: выполняет роль индикатора.
• Агар: твердеющий агент.

Виды Vibrio в целом являются алкалофилами и хорошо растут при относительно высоком содержании желчных солей, что требует использования сред с щелочным pH для их изоляции. V. vulnificus по виду на агаре TCBS напоминает V. parahaemolyticus, но дифференцируется с помощью биохимических реакций, включая активность бета-галактозидазы, или с помощью гибридизации с ДНК-зондами.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте разведение образца 1:10 в фосфатно-солевом буферном растворе (PBS).
2. Перемешайте смесь в течение 60 с.
3. При необходимости подготовьте соответствующие серии разведений.
4. Внесите пипеткой 0,1 мл соответствующего разведения на маркированные чашки с агаром VVA.
5. Инкубируйте чашки в течение 18–24 ч при температуре 35 ±2 °C.

Интерпретация результатов: Типичными для V. vulnificus на данной среде являются относительно крупные (1–2 мм) жёлтые непрозрачные колонии с видом «глазуньи» (fried egg appearance). Такие колонии могут быть использованы для количественного определения V. vulnificus с помощью ДНК-зонда.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 85,06 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 8,20 ± 0,2.

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,5% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.
• Реакция: pH 8,20 ± 0,2 для 8,51% (м/об) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 8,00–8,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения и ограничения

Типы образцов: пищевые продукты и молочная продукция.

Ограничения:

• Некоторые изоляты могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической работы с культурами.
• Утилизация: загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.