HiMedia M1869-500G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1869-500G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом производства HiMedia в порошкообразной форме предназначена для скрининга и подтверждения видов Vibrio. Среда применяется для анализа пищевых образцов, содержит L-аргинин гидрохлорид и обеспечивает дифференциацию по ферментации глюкозы и гидролизу аргинина.

Назначение

Среда рекомендована для скрининга и подтверждения видов Vibrio в соответствии с FDA BAM, 1998.

Тип образца: пищевые образцы.

Состав

Формула на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,1.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio представляют собой неспорообразующие подвижные палочки с полярными жгутиками. К хорошо документированным патогенам человека, особенно при кишечных заболеваниях, включая холеру, относятся V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus и V. mimicus. V. alginolyticus, V. fluvialis, V. furnissii, V. metschnikovii и V. hollisae рассматриваются как условно-патогенные микроорганизмы.

Аргинин-глюкозо-дрожжевой агар используют для скрининга и подтверждения видов Vibrio в пищевых образцах.

Пептон, триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы углеродсодержащими и азотсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью и витаминами группы B. Декстроза (глюкоза) служит ферментируемым источником углерода. Цитрат аммония железа и тиосульфат натрия используются как индикаторы образования H₂S. Бромкрезоловый пурпурный является индикатором pH. Среда содержит L-аргинин HCl.

Микроорганизмы, которые не декарбоксилируют L-аргинин HCl, но ферментируют глюкозу, образуют щелочную реакцию в скошенной части среды и кислую реакцию в столбике.

Подозрительную культуру, идентифицированную предварительным методом, инокулируют на скосы аргинин-глюкозо-дрожжевого агара штриховым посевом по скошенной части и уколом в столбик. Инкубируют пробирки с неплотно закрытой крышкой в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, в результате чего цвет среды изменяется с пурпурного на жёлтый. При ферментации в столбике выделяется больше кислот, чем в скошенной части, где преобладают процессы дыхания. Растущие бактерии, способные гидролизовать аргинин, образуют более щелочные продукты, нейтрализующие кислоту в столбике; в результате среда приобретает пурпурную окраску.

Культуры V. cholerae, V. mimicus, V. parahaemolyticus и V. vulnificus имеют щелочную пурпурную скошенную часть и кислый жёлтый столбик, поскольку аргинин не гидролизуется. V. fluvialis, V. furnissii и V. hollisae демонстрируют положительный гидролиз аргинина, который определяется по пурпурной окраске скошенной части и столбика. Ни один из перечисленных микроорганизмов не образует газ или H₂S.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,32 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по 5 мл в пробирки.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 10–12 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Дайте среде застыть в наклонном положении, сформировав столбик и скошенную часть.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках со столбиком и скошенной частью образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,83 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,9 ± 0,1.

Диапазон pH

pH: 6,80–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 33–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар, питательная среда для микробиологического анализа
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение: животного происхождения
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,1
• Диапазон pH: 6,80–7,00
• Температура приготовления и формирования среды: 45–50 °C
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время стерилизации: 10–12 мин
• Температура инкубации: 35 ± 2 °C
• Температура инкубации при контроле культуральных характеристик: 33–37 °C
• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности. Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются на оптимальном уровне при использовании в течение указанного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Из-за различий в питательных потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.