HiMedia M1869-500G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом

Сухая питательная среда HiMedia M1869-500G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом для скрининга и подтверждения видов Vibrio. Применяется для анализа образцов пищевых продуктов в соответствии с методикой FDA BAM; вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для первичного скрининга и подтверждения наличия бактерий рода Vibrio в образцах пищевых продуктов. Она позволяет дифференцировать патогенные виды, такие как V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus и V. mimicus, от оппортунистических патогенов (V. alginolyticus, V. fluvialis, V. furnissii, V. metschnikovii и V. hollisae).

Принцип измерения и интерпретация

Виды Vibrio представляют собой беспорообразующие подвижные палочки с полярными жгутиками.

Состав и функции компонентов

• Пептон, триптон и дрожжевой экстракт: обеспечивают необходимые углеродные и азотистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты и витамины комплекса B.
• Декстроза (глюкоза): служит ферментируемым источником углерода.
• Цитрат железа-аммония и тиосульфат натрия: индикаторы продукции сероводорода (H₂S).
• Бромкрезоловый пурпурный: индикатор pH.
• L-аргинина гидрохлорид: ключевой дифференцирующий компонент.

Механизм дифференциации

Организмы, которые ферментируют глюкозу, но не декарбоксилируют L-аргинин, создают кислую среду в столбике (butt) и щелочную на скосе (slant).

1. Бактерии, ферментирующие глюкозу, вырабатывают кислоты, что меняет цвет среды с пурпурного на жёлтый. В столбике (где происходит ферментация) вырабатывается больше кислоты, чем на скосе (где преобладает дыхание).
2. Бактерии, способные гидролизовать аргинин, вырабатывают щелочные продукты, которые нейтрализуют кислоту в столбике, возвращая среде пурпурный цвет.

Интерпретация результатов:

• V. cholerae, V. mimicus, V. parahaemolyticus и V. vulnificus: щелочный (пурпурный) скос и кислый (жёлтый) столбик (аргинин не гидролизуется).
• V. fluvialis, V. furnissii и V. hollisae: положительный гидролиз аргинина, что проявляется пурпурным цветом как на скосе, так и в столбике.
• Газ и H₂S не образуются ни одним из указанных организмов.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 58,32 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить по 5 мл в пробирки.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 10–12 минут.
5. Охладить до 45–50 °C и оставить застыть под наклоном для формирования скоса и столбика.

Процедура анализа

1. Посеять подозрительную культуру, идентифицированную предварительным методом, на скос среды, используя метод штриха и глубокого посева (прокола) в столбик.
2. Инкубировать с неплотно закрытой крышкой в течение суток при температуре 35 ± 2 °C.

Технические характеристики

Состав, г/л

• Конечный pH (при 25 °C): 6,9 ± 0,1

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 33–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Из-за вариаций в питательных свойствах некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• При работе с образцами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.