HiMedia M1869-100G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом

Сухая питательная среда HiMedia M1869-100G (агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом) для скрининга и подтверждения видов Vibrio. Применяется для анализа образцов пищевых продуктов в соответствии с методикой FDA BAM; вес упаковки составляет 100 г.

Область применения

Среда рекомендуется для первичного скрининга и подтверждения наличия бактерий рода Vibrio в пищевых пробах. Используется для дифференциации патогенных видов, таких как V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus и V. mimicus, а также оппортунистических патогенов (V. alginolyticus, V. fluvialis и др.).

Принцип измерения

Среда основана на способности микроорганизмов ферментировать глюкозу и гидролизовать L-аргинин.

• Питательные компоненты: пептон, триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают углеродными и азотистыми соединениями, длинноцепочечными аминокислотами и витаминами группы B.
• Углевод: декстроза (глюкоза) служит ферментируемым источником углерода.
• Индикаторы: бромкрезол пурпурный служит pH-индикатором; цитрат аммония железа (III) и тиосульфат натрия используются для определения продукции H₂S.

Организмы, которые ферментируют глюкозу, но не декарбоксилируют L-аргинин, создают кислую среду в столбике (butt) и щелочную на скосе (slant). Бактерии, способные гидролизовать аргинин, вырабатывают щелочные продукты, которые нейтрализуют кислоту в столбике, окрашивая среду в пурпурный цвет.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 58,32 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по 5 мл в пробирки.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении ≈0,1 МПа (15 фунтов) в течение 10–12 минут.
5. Охладите до 45–50 °C и дайте среде застыть под наклоном, чтобы сформировались скос (slant) и столбик (butt).

Процедура анализа

1. Внесите подозрительную культуру, идентифицированную предварительным методом, в пробирку с агаром путем посева на скос и глубокого посева (прокола) в столбик.
2. Инкубируйте при температуре 35 ± 2 °C в течение суток с неплотно закрытой крышкой.

Интерпретация результатов

• Положительная ферментация глюкозы: изменение цвета среды с пурпурного на жёлтый (кислота вырабатывается в большем количестве в столбике, чем на скосе).
• Отсутствие гидролиза аргинина: пурпурный скос (щелочная реакция) и жёлтый столбик (кислая реакция). Характерно для V. cholerae, V. mimicus, V. parahaemolyticus и V. vulnificus.
• Положительный гидролиз аргинина: пурпурный цвет как на скосе, так и в столбике. Характерно для V. fluvialis, V. furnissii и V. hollisae.
• Газ и H₂S: не образуются ни одним из исследуемых организмов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,9 ± 0,1

Общие параметры

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,35% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 6,80–7,00 (для 5,83 % w/v водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 33–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
• Ограничения: из-за вариативности питательных веществ некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.