HiMedia M1869-100G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом

Питательная агаровая среда HiMedia M1869-100G Агар с аргинином, глюкозой и дрожжевым экстрактом — порошковая среда для микробиологического анализа. Среда предназначена для скрининга и подтверждения видов Vibrio в пищевых образцах; готовая среда формируется в пробирках в виде скошенной части со столбиком при конечном pH 6,9 ± 0,1.

Назначение

Среда рекомендована для скрининга и подтверждения видов Vibrio в соответствии с бактериологическим аналитическим руководством FDA (FDA BAM, 1998). Тип исследуемого материала — пищевые образцы.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,32 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по 5 мл в пробирки.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 10–12 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Дайте среде застыть в наклонном положении, чтобы сформировались скошенная часть и столбик.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio представляют собой неспорообразующие подвижные палочки с полярными жгутиками. Среди различных видов V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus и V. mimicus являются документированными патогенами человека, особенно при кишечных заболеваниях, таких как холера. Виды V. alginolyticus, V. fluvialis, V. furnissii, V. metschnikovii и V. hollisae относятся к условно-патогенным микроорганизмам.

Аргинин-глюкозо-дрожжевая агаровая среда применяется для скрининга и подтверждения видов Vibrio в пищевых образцах в соответствии с FDA BAM.

Пептон, триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми углеродсодержащими и азотсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью и комплексом витаминов группы B. Декстроза (глюкоза) служит ферментируемым источником углерода. Цитрат аммонийного железа и тиосульфат натрия используются как индикаторы образования H₂S, а бромкрезоловый пурпурный — как индикатор pH.

Среда содержит гидрохлорид L-аргинина. Микроорганизмы, которые не декарбоксилируют гидрохлорид L-аргинина, но ферментируют глюкозу, формируют щелочную скошенную часть и кислый столбик.

Подозрительную культуру, идентифицированную предварительным методом, инокулируют на скошенную поверхность среды штриховым посевом и проколом столбика. Инкубируют пробирки с неплотно закрытой крышкой в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, изменяя цвет среды с пурпурного на жёлтый. При ферментации в столбике высвобождается большее количество кислот, чем в скошенной части, где преобладают процессы дыхания. Растущие бактерии, способные гидролизовать аргинин, образуют более щелочные продукты, которые нейтрализуют кислоту в столбике и возвращают среде пурпурную окраску.

Культуры V. cholerae, V. mimicus, V. parahaemolyticus и V. vulnificus имеют щелочную, пурпурную скошенную часть и кислый, жёлтый столбик, поскольку аргинин не гидролизуется. V. fluvialis, V. furnissii и V. hollisae демонстрируют положительный гидролиз аргинина, который определяется по пурпурной окраске скошенной части и столбика. Согласно описанию методики, ни один из микроорганизмов не образует газа или H₂S.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Желирование

Желирование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,35 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скошенной части со столбиком формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурного цвета.

Реакция среды

Реакция: реакция 5,83 % водного раствора по массе при 25 °C; pH 6,9 ± 0,1.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,80–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 33–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед у